NaCl在培养基中的作用说明

　　NaCl在培养基中的作用

　　钠离子不参与细胞的组成，但仍是微生物发酵培养基的必要成分，钠离子与维持细胞渗透压有关，故在培养基中常加入少量的钠盐，但用量不能过高，否则会影响微生物的生长。

　　氯离子在一般微生物中不具有营养作用，但对一些嗜盐菌来讲是需要的，在一些产生含氯代谢物的发酵中，除了从其他天然原料和水中带入的氯离子外，还需加入一定量的氯化物补充氯离子。

　　实验证明，在无机大量元素中，NaCl与维持细胞内外渗透压平衡，K2HPO4在培养基起缓冲剂调节pH值的作用，用量不能过高，否则会影响微生物的生长，一般用量在5％以内。

　　在固体培养基培养时，其实也是这个道理，细菌在利用基质时能同时吸收NaCl，在体内也能起到类似的作用即维持渗透压的作用。

　　特别是有的嗜盐菌，需要达到一定的盐浓度才能激活体内的某些酶才能生长正常的。

　　培养基的配制：

　　1、配料：在容器中加入少量水，按照配方称取各种药品，加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。

　　2、溶解：淀粉溶解：少量冷水调成糊状，加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃ ，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

　　3、调PH：用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。

　　4、过滤：滤纸或棉花进行过滤。

　　5、分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

　　(1)三角瓶

　　若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。

　　(2)试管分装

　　液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度。

　　固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。

　　6、包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

　　7、灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

　　8、摆斜面：灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

　　9、贮存：培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。