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如何挑选适合实验的ELISA试剂盒之实验类型

来源:研域(上海)化学试剂有限公司   2023年08月22日 09:39  

ELISA是一种广泛应用于大分子蛋白和小分子激素定量检测的免疫诊断技术。ELISA实验操作虽然不算复杂,但也有许多需要注意的事项。各个环节稍有不慎,就可能对实验结果产生影响。

ELISA试剂盒有多种类型,不过它们都有一个共同特点,就是进行抗原捕获。一般捕获形式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。In-cellELISA和酶联免疫斑点ELISPoT是两种特殊的类型,In-cellELISA需要将微孔板中培养的细胞进行固定和通透化,然后再用抗体原位检测。ELISPoT有点像蛋白印迹Westexnb1ot,先在带膜的微孔板中培养细胞,然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外,我们还需要根据自身需要选择96孔板或是38孔板进行ELISA实验。

通常人们使用双抗夹心法进行ELISA实验,双抗夹心法中抗原被夹在捕获抗体和检测抗体之间,这种方法既灵敏又有效,受到了许多研究者的青睐。不过有时候双抗夹心法并不是ui佳选择,例如有时候抗原特别小让两个大抗体难以附着,又或者抗体只有一个抗体结合位点。在上述情况下,竞争性ELISA就更为适用,这种方法是采用带标记的纯化抗原与样本中无标记的抗原进行竞争,以结合捕获抗体。

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