疏水色谱柱具有哪些特点？

来源：东曹（上海）生物科技有限公司 2023年07月31日 09:07

疏水色谱柱是利用样品分子与固定相的疏水力作用的不同，用流动相洗脱时，各组分迁移速度不同而达到分离的目的。流动相一般为pH 6-8的盐水溶液，具有对蛋白质的回收率高，蛋白质变性可能性小等优势。由于流动相中不使用有机溶剂，也有利于蛋白质保持固有的活性。

不同于反相色谱，在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低，且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。

盐浓度较高时会产生吸附作用，但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度，则会产生脱附作用。

尽管二者均以疏水作用为基础，但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。

相对于RPC，HIC的最高容量较低，但其优势在于：流动相条件（主要是含水流动相）通常不会破坏高阶蛋白质结构。

TSKgel Phenyl-5PW疏水色谱柱（HIC）能够有效分离抗体的结构同分异构体。在抗体药物中，对于一些由于等电点相同而无法通过离子交换色谱法实现分离的，但表面疏水性有差异的结构同分异构体、或多聚体，可以考虑使用疏水色谱法来进行分析。并且疏水色谱法也可以用于抗体降解产物的分析。

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