荧光定量PCR检测方法和应用环境

实时荧光定量PCR（quantitative PCR, qPCR）通过对PCR扩增反应中的每一个循环产物荧光信号的实时监测，实现对起始模板的定性及定量分析。目前主要通过荧光染料或者荧光标记的探针对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，并结合相应的软件对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。实时荧光定量PCR检测法在生物学、医药学上都有着广泛的应用。

实时荧光定量PCR检测法的应用场景和范围

DNA或RNA的绝对定量分析

包括病原微生物或病毒含量的检测，转基因动植物拷贝数的检测，RNAi 基因失活率的检测等。

基因表达差异分析

例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 (如药物处理、物理处理、化学处理等)，特定基因在不同时相的表达差异以及 cDNA 或差显结果的确证。基因分型。例如 SNP 检测，甲基化检测等。

病原体定量测定

目前，采用荧光定量 PCR 检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、肝炎病毒、结核杆菌、细小病毒 B19、EB 病毒和人巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。

药物研发和疗效研究

实时荧光定量 PCR 技术可以快速、准确、定量、灵敏地测定血液或组织中病原体的含量，因此有利用分析药物的作用效果，为比较不同的配方的疗效、用药量、用药时间等等提供快速、定量的评价。

实时荧光定量PCR检测法的应用场景和范围

DNA或RNA的绝对定量分析

包括病原微生物或病毒含量的检测，转基因动植物拷贝数的检测，RNAi 基因失活率的检测等。

基因表达差异分析

例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 (如药物处理、物理处理、化学处理等)，特定基因在不同时相的表达差异以及 cDNA 或差显结果的确证。基因分型。例如 SNP 检测，甲基化检测等。

病原体定量测定

目前，采用荧光定量 PCR 检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、肝炎病毒、结核杆菌、细小病毒 B19、EB 病毒和人巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。

药物研发和疗效研究

实时荧光定量 PCR 技术可以快速、准确、定量、灵敏地测定血液或组织中病原体的含量，因此有利用分析药物的作用效果，为比较不同的配方的疗效、用药量、用药时间等等提供快速、定量的评价。