PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上 。还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。
实验准备:
1、10g/L过碘酸液
2、Schiff染液:
碱性品红 0.5g
DH2O 100ml
煮沸后,待片刻,加入碱性品红,振荡数分钟使品红溶解,冷至50℃加入1M的盐酸20ml,混匀。待冷却至25℃加入偏重亚硫酸钠0.5g,混合,置于带塞的棕色瓶中,放于暗处24小时,染液为无色,如为微红则加活性炭1-2g,混合过滤,如过滤液仍有红色,应再加少许活性炭,时红色被吸收为止。制成后置于棕色瓶内保存在冰箱备用,如变为红色,则不能使用。
4、苏木素液:
苏木素 0.9g
95%乙醇 10ml
铵(钾)明矾 20g
DH2O 200ml
将苏木素溶于95%的乙醇,钾明矾溶于水(可加热),然后将苏木素液加入明矾液中混合,用强火煮沸后加氧1化汞0.5g,迅速搅拌,成深紫色,迅速移入冷水中,次日过滤,临用时取此液95ml加冰醋酸5ml,可使细胞着色清楚。
方法
1、将新鲜血片或骨髓片用95%乙醇固定10分钟;
2、10g/L过碘酸液作用20分钟;
3、DH2O洗涤几次,晾干;
4、Schiff染液,60分钟;
5、用自来水洗涤15分钟(细水长流冲洗);
6、苏木素染液10分钟;
7、自来水冲洗15分钟,待干。
结果判读:
糖原、中性粘液物质、软骨基质、植物的真菌和细胞壁、上皮的基膜等均呈紫红色,细胞核浅蓝色
送样运输要求:
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
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