摘要：

本品为15种氨基酸和2种双肽配制而成的灭菌水溶液，使用Biochrom30+全自动氨基酸分析仪对其所含的游离氨基酸组成进行分析。结果表明该复方氨基酸双肽注射液中氨基酸总量的浓度分别为：

样品1：7190.178umol/mL；

样品2：7258.812 umol/mL。

单个氨基酸含量，分别见附页结果表。

一、样品前处理

1、所用试剂

1.1 Loading Buffer：锂盐系统，pH 2.2

1.2 0.06mol/L 盐酸：取50mL 盐酸加水稀释至10mL,混匀

1.3 17种氨基酸标准品

2、 前处理设备

1）分析天平:精度为 0.0001g

2）移液枪及枪头

3）0.22um滤膜

4）一次性注射器

5）低范围pH试纸

3、样品制备（参考2020中国药典二部）

将样品（注射液）吸取适量体积后，用Loading Buffer将其稀释至合适浓度。蘸取少量稀释后溶液至pH试纸上，观察其的pH值是否达到2.2。可用1.1、1.2试剂调节样品pH值至合适。

移液枪取上述溶液1mL至一次性注射剂，过滤膜，上机待测。

二、分析方法描述（Biochrom 30+）

氨基酸分析仪分析方法参数：

1）色谱柱：Biochrom Li型阳离子交换树脂柱，4.6´20cm

2）分离程序：

3）运行时间：经分析时间+再生时间 168min

4）反应单元温度：135°C。

5）检测波长：570nm、440nm同时检测。

三、样品中氨基酸含量的计算

样品测定液氨基酸的含量按式(1)计算:

Ci = Cs/As × Ai× F ……………………(1)式中:

Ci ———样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL);

Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积;

As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;

F ———样品稀释倍数。

附、复方氨基酸双肽注射液分析图谱及做样结果

图1.  样品1 稀释50倍