提取DNA后,大多数实验的下一阶段需要已知浓度作为输入材料。有许多方法可以测量DNA浓度,例如紫外线吸收,荧光染料和电泳。
DNA分光光度计通常用于测量浓度,本文将概述它们的工作原理以及使用原因。
DNA分光光度计的用途是什么?
分光光度法是一种重要的方法,用于一系列生化实验,包括DNA,RNA和蛋白质定量和质量控制。在这些应用中,样品通常只能少量提供,最好进行无损分析。使用微量分光光度计(有时称为纳米体积或纳米滴分光光度计)可最大限度地减少样品定量的使用,通常只需要 1μL 样品。
DNA分光光度计如何工作?
分光光度法是电磁光谱学的一种形式,涉及定量测量材料的透射或反射特性作为波长的函数。DNA分光光度计使用检测器记录一定波长范围内的光束强度。
DNA分光光度计经常用于紫外线,红外线和可见辐射,但是,它们也可以询问电磁光谱的许多其他元素。波长范围(可以通过测试样品传输的颜色)是DNA光谱仪的一个重要特征。此外,样品透射百分比、样品吸收的对数范围以及偶尔的反射率测量百分比是某些应用的重要特性。
在溶液中,DNA分光光度计可以测量碱基吸收的紫外线水平。DNA和其他核酸吸收峰值波长为260nm的光。吸收的光量与样品中DNA的浓度成正比。浓度是使用比尔-朗伯方程根据透射光量计算的。为了用分光光度计定量DNA,应将DNA悬浮在溶剂中,并且分光光度计应用溶剂空白以校正任何背景吸光度。
分光光度计是极其精确、准确和复杂的设备,可用作实验室中的台式或模型,或便携式进行现场工作。
DeNovix的DS-11系列在分光光度法领域具有革命性的性能。它结构紧凑且易于使用,能够提供具有荧光功能的全光谱紫外-可见分光度计分析,这意味着它非常适合快速核酸和蛋白质定量。
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