猪肾中微粒体膜组分粗品的分离

      仪器与试剂

      1.超速离心机（冷冻离心机）和转头

      2.匀浆缓冲液。50m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4），0.33mol/L蔗糖。

       3.重悬缓冲液。10m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4）。

      方法

       1.使用韦林搅拌器（要求4℃预冷）在10倍体积（1L）的匀浆缓冲液（要求4℃预冷），中破碎100g猪肾皮质。

        2.将匀浆物在离心机中于8000×g离心15min；

         3.小心地转移出上清液，并将其在26000×g离心2min；

          4.用重悬缓冲液（要求4℃预冷）重悬离心得到的微体沉淀至蛋白质终浓度约为10mg/ml。这样得到的微粒体沉淀重悬物就是膜结合蛋白质的来源