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怎么调整附有荧光部件的显微镜?

来源:孚约生物科技(上海)有限公司   2023年03月14日 09:52  

首先说下什么叫落射荧光法?物质发射荧光的特性所设计的一类光学法,让某些芳香环、芳香杂环化合物具有发射荧光的特性,其发射荧光的强度和物质浓度呈线性关系。落射光激发的荧光法简称为落射荧光法,在近代时期,显微镜检检测技术中发现了一种强有力的反差增强法。将激发荧光用的光源改在物镜的上方,光由物镜上方经反光镜射入物镜去激发样品,从样品上被激发的荧光经物镜成像并穿透反光镜而由目镜观察。


荧光方法是利用波长较短的紫外光、紫光、蓝紫光、蓝光及绿光等去激发样品,只要样品中含有可产生荧光的成分,它便吸收短波的激发光而释放出波长较长的荧光。荧光方法广泛应用于生物学及工业的特异性研究,接下来说下附有荧光部件的显微镜调整的方法。


落射荧光法1.jpg



一、显微镜汞灯怎么安装?


(1)取出汞灯将其小心安装在上电极散热帽上,注意手指不能直接接触灯管和散热帽的正面,汞灯的封气口要对向散热帽的左侧或右侧;


(2)把汞灯的上电极安装并固定在散热帽底面的小孔上,再把电极及上电极引线另一端,分别安装在灯座上各自的插孔中并固定;


(3)锁紧散热片上的螺丝后,把汞灯连同灯座及散热帽小心装入灯室中,锁紧相应的螺丝,灯座上的连线和插座插到汞灯电源后部专用的插座上。


落射荧光法2.jpg



二、汞灯灯室调整:


(1)接通汞灯电源,让汞灯预热10-15分钟;


(2)把汞灯灯室摆放在桌面上,让汞弧投影到2-3m外的墙上,划一条与灯室窗口中心线水平线作为参考线;


(3)转动灯室调焦旋钮,使汞弧的像清晰地投影于墙上;


(4)分别调节灯室外壳上的5个调节螺丝孔,把汞弧的像其反射像调成并排且尽量靠近,但不要重叠在一起。


落射荧光法3.jpg



三、如何检测汞弧?


(1)将汞灯照明光路系统中的视场光阑开到最大;


(2)把荧光滤光片组推到蓝光激发的位置上,以避免汞灯中的蓝光太刺眼;


(3)把观察的样品或一块载玻片放在物台上,盖上一张比盖玻片稍大且洁白的薄纸;


(4)取下一个物镜,使激发的蓝光经物镜转换器的空档照在白纸上,白纸上会有一蓝色的圆形照明区域,汞弧像出现在区域的中央区域,调节灯室外壳上的5个调节螺丝孔,直至汞弧的像及其反射像并排在照明区域的中央位置。


(5)仔细调焦,可看清白纸的纤维;取去白纸,样品上的荧光细节隐约可见而很容易调焦清晰。


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