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蛋白印迹仪的用途及注意事项

来源:默克生命科学-默克化工技术(上海)有限公司   2023年02月23日 10:07  
蛋白印迹仪被广泛应用于临床诊断领域,如筛选和确诊引起感染性疾病的不同致病源(如病毒或细菌),以及过敏原鉴定。全自动蛋白印迹仪能将蛋白印迹处理中的所有关键步骤自动化,尤其是繁琐的清洗和孵育步骤。
蛋白质印迹法,它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
注意事项:
如果出现非特异性的高背景,可观察仅用二抗单独处理转印膜所产生的背景强度,若高背景确由二抗产生,可适当降低二抗浓度或缩短二抗孵育时间;并考虑延长每一步的清洗时间。
一抗与二抗的稀释度、作用时间和温度对检测不同的蛋白要求不同,须经预实验确定最佳条件。
滤纸/凝胶/转印膜/滤纸夹层组合中不能存在气泡,可用玻璃棒在夹层组合上滚动将气泡赶出,以提高转膜效率;上下两层滤纸不能过大,避免导致直接接触而引起短路。

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