冰冻切片纤维蛋白（fibrin）卡斯塔莱斯（carstairs）染色

80128.2 v.A

   冰冻切片纤维蛋白（fibrin）卡斯塔莱斯（carstairs）染色试剂盒产品说明书

（中文版）

主要用途

   冰冻切片纤维蛋白（fibrin）卡斯塔莱斯（carstairs）染色试剂是一种旨在使用三色染料（trichrome），分析和区分冰冻组织切片中的纤维蛋白和血小板成分的而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于心血管系统的研究等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景

纤维蛋白（fibrin），又称为活化凝血因子I（Factor Ia），是一种嗜酸性（acidophil）不溶性非球蛋白，来自于血浆中的纤维蛋白原（fibrinogen），经过凝血酶的水解后聚合而成。其主要功能包括信号传导、血液凝结、血小板活化，以达到终止出血，即组织损伤引起血管和血小板开始反应，使纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成网架，产生血凝块而止血。纤维蛋白异常增多会导致血栓（thrombosis），而产生不足，引起出血，例如纤维蛋白原血症（dysfibrinogenaemia）。血小板（platelet），一种圆盘状（flattened disc）的无核血液细胞，直径4微米，厚度1微米，由骨髓巨核细胞产生，生命周期7至10天，通过肝脏和脾脏巨噬细胞排除。其功能主要为粘附、激活和聚集。其中与纤维蛋白聚集一起，构成凝。卡斯塔莱斯（carstairs）染色技术主要用于区分纤维蛋白、血小板，以及胶原蛋白和红细胞的染色技术。   

产品内容

   清理液（Reagent A）           毫升

   固着液（Reagent B）           毫升

   媒染液（Reagent C）              毫升

   梅氏液（Reagent D）                  毫升

   桔染液（Reagent E）           毫升

   品红液（Reagent F）           毫升

   酸性液（Reagent G）           毫升

   染色液（Reagent H）           毫升

产品说明书              1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证3月

用户自备

小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器

培养箱或烘箱：用于样品反应孵育

中性树脂：用于切片封片

光学显微镜：用于切片染色后观察分析

实验步骤

1． 取出10片待测的5微米厚的冰冻组织切片

2． 小心加上xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面

3． 室温下孵育2分钟

4． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

5． 小心加入xx微升   固着液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面

6． 室温下箱孵育48小时或96小时

7． 小心移去   固着液（Reagent B）

8． 室温下，小心将切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分钟

9． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

10． 小心加入xx微升   媒染液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面

11． 室温下箱孵育5至10分钟 

12． 小心移去   媒染液（Reagent C）

13． 室温下，小心将切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分钟

14． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

15． 小心加入xx微升   梅氏液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面

16． 室温下孵育5分钟

17． 小心移去   梅氏液（Reagent D）

18． 室温下，小心将切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育5分钟

19． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

20． 小心加入xx微升   桔染液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面

21． 室温下孵育30至60分钟 

22． 小心移去   桔染液（Reagent E）

23． 小心加入xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面

24． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

25． 小心加入xx微升   品红液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面

26． 室温下孵育1至5分钟 

27． 小心移去   品红液（Reagent F）

28． 室温下，小心将切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分钟

29． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

30． 小心加入xx微升   酸性液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面

31． 室温下孵育2分钟，或直至肌肉呈现红色（注意：可以镜下观察） 

32． 小心移去切片上的   酸性液（Reagent G）

33． 室温下，小心将切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分钟

34． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

35． 小心加上xx微升    染色液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面

36． 室温下孵育10分钟至2小时，或直至胶原纤维显示蓝色（注意：可以镜下观察）

37． 小心移去切片上的   染色液（Reagent H）

38． 室温下，小心将切片置入xx毫升   清理液（Reagent A）中孵育2分钟

39． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

40． 放上盖玻片或封片（中性树脂）

41． 即刻在一般光学显微镜下观察：

注意事项

1． 本产品为50次操作

2． 操作时，须戴手套

3． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全 

4． 建议使用玻璃染色缸

5． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干

6． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面

7． 整个操作，在避光状态下进行

8． 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 

9． 样品染色后保存，避免光照

10． 本公司提供系列纤维蛋白染色试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定显色清晰