手性色谱柱是将具有光学活性的单体固定在硅胶或其它聚合物上所制成手性固定相。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成,特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。由于这种作用力较微弱,因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到好的分离效果。
在使用手性色谱柱的过程中要避免压力和温度的急剧变化,在进阀出阀的转动不能过缓,了解关于使用的一些相对性环境,选择使用适宜流动相才能避免定向的破坏,避免将机制复杂的样品掺入到生物样品中进行使用,要保护产品的使用模式,了解每次使用的方法。
当使用手性色谱柱出现压力高的原因可能是流动相中醇含量过高,或液相流路堵塞,或柱头有样品沉淀,或填料被压缩柱头塌陷。根据不同原因,请采取相应措施。如果流动相中醇含量过高,则需要升温或降低流速。如果液相流路中有堵塞,则需要排除堵塞。如果柱头有样品沉淀,则需要使用流动相溶解样品和样品预处理来去除样品中的易沉淀成分。如果填料被压缩柱头塌陷,则需要重新购买新的手性柱。
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