重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。在知道编码该蛋白的基因序列之后,人工克隆该基因进入质粒。然后再把质粒转染如大肠杆菌。这样大肠杆菌就成了蛋白表达的工厂。表达出来的蛋白再进过分离纯化,就是重组蛋白。
重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。
重组蛋白有三种较为广泛使用的表达系统,即大肠杆菌表达系统、酵母表达系统和CHO细胞表达系统。其中,大肠杆菌是表达重组蛋白较常用的宿主菌,已应用于许多具有重要药用价值的蛋白质的生产。
大肠杆菌表达系统具有生长速度快、培养成本低、遗传背景清晰、易于实现高密度培养等优点。大肠杆菌DH5α是一种突变株,主要表现为对外来DNA缺乏免疫力。大肠杆菌DH5α是基因工程中常用的宿主菌之一。与正常菌株相比,它缺乏某种免疫机制。
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