Universal通用植物总RNA提取试剂盒的使用提取步骤

来源：北京众仁鑫商贸有限公司 2022年11月11日 14:29

通用植物总RNA提取试剂盒适用于普通植物组织细胞的总RNA提取。采用裂解液可以迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，结合多次柱漂洗的方式，可提取没有蛋白、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。

提取步骤：

1.将处理后的样品在室温静置5~10分钟，使得核酸蛋白复合物分离。

2.可选步骤：12,000rpm离心10分钟，小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。（当样品富含多糖或是植物的块茎部分时可能需要此额外的分离步骤）。

3.每1ml裂解液RL加200μl氯仿。盖紧样品管盖，剧烈振荡15秒，室温静置3分钟。

4.在4°C12,000rpm离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上清水相，RNA存在于上清水相中。把上清水相转移到新管中（不要触碰中间层）。

5.加入上清水相0.5倍体积的无水乙醇，立即吹打混匀。

6.转入套有收集管的吸附柱RA中，12,000rpm 离心45秒，弃掉废液。

7.加500μl去蛋白液RE，12,000rpm离心45秒，弃掉废液。

8.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm离心45秒，弃掉废液。

9.重复步骤7次。

10.将吸附柱RA放回空收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

11.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase-free离心管中，在吸附膜的中间部位加50 ~ 80μl RNase-free H2O，室温静置2分钟，12,000 rpm离心1分钟，取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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