台式大容量离心机的分离条件如何有效确定?
台式大容量离心机的分离技术是根据颗粒在一个实用离心场合中的状态而发展起来的新技术。不同密度、大小或形状的颗粒在不同的离心场合中沉降,所以一个大体是球形非均一的混合物,可以用离心的方法加以分离,应用离心机是为了进一步研究生物化学分离大量的物质。例如收集细胞,分离血浆,从这些预纯化的制剂中分离DNA和蛋白质分子,并可分离出病毒以及大规模大肠杆菌,严细胞成分,核蛋白微粒等。
台式大容量离心机在生物行业主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备:
1.低速离心机主要用于细胞、细胞核、细胞膜的沉淀和收集等;
2.高速离心机主要用于制备和收集微生物、细胞碎片、大的细胞器等;
3.超高速离心机主要用于分离、提纯、鉴定和分析线粒体、微粒体、染色体、溶酶体、质粒、大分子核酸、高分子蛋白质等。
台式大容量离心机的分离条件确定无外乎这几点:
1.转速
离心力大小取决于转子的转速和离心半径。在说明离心条件时,低速离心通常以转子每分钟的转数(rpm)表示。在高速离心,特别是超高速离心时,往往用相对离心力(RCF)表示。实际工作中,离心力通常指相对离心力的平均值,即离心管中点的离心力。
2.分离时间
分离时间因离心方法不同而有差别:对于差速离心,分离时间是指颗粒*沉降到离心管底的时间;对于速率区带离心,分离时间是指形成界限分明的区带的时间;对于等密度区带离心,分离时间是指颗粒*到达等密度点的平衡时间;对于速率区带离心所需的区带形成时间和等密度区带离心所需的平衡时间,影响因素很复杂,可通过试验确定。
3.分离温度
为防止分离物质的凝集、变性和失活,除了注意离心介质的选择外,还必须控制好分离温度,分离温度一般控制在4℃左右。对于热稳定性较好的物质,可在室温下进行离心分离。在高速离心或超高速离心时,转子高速旋转会发热从而引起温度升高,必须采用冷冻系统,使温度保持在一定范围内。
4.介质溶液PH值
离心介质溶液PH值应该处于分离物质稳定的PH范围内,必要时可采用缓冲液。另外,过酸、过碱可能引起转子和离心机其它部件的腐蚀,应尽量避免。
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