GB 23200.53-2016 食品安全国家标准

食品中氟硅唑残留量的测定

气相色谱-质谱法

前言

本标准代替SN/T 2236-2008 《进出口食品中氟硅唑残留量检测方法气相色谱-质谱法》。

本标准与SN/T 2236-2008相比，主要变化如下：

—标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；

—标准名称中“进出口食品”改为“食品”；

—标准范围中增加“其它食品可参照执行”。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

—SN/T 2236-2008。

1 范围

本标准规定了食品中氟硅唑残留量的气相色谱-质谱检测及确证方法。

本标准适用于大米、大豆、小菘菜、鲜豌豆、梨、柑桔、花生、茶叶、牛肉、鸡肉、虾肉、蜂蜜中氟硅唑残留量的检测和确证，其它食品可参照执行。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改dan）适用于本文件。

GB 2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留xian量

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

样品经乙腈提取，水果、蔬菜经石墨化碳黑和氨基固相萃取串联柱净化，粮谷、坚果、肉类、茶叶和蜂蜜经弗罗里硅土固相萃取柱净化，气相色谱-质谱检测和确证，外标法定量。

4 试剂和材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。

4.1 试剂

4.1.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。

4.1.2 甲苯（C7H8）：色谱纯。

4.1.3 正己烷（C6H14）：色谱纯。

4.1.4 乙mi（C4H10O）：色谱纯。

4.1.5 氯化钠（NaCl）：分析纯，650 ℃灼烧4 h, 在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。

4.1.6 无水硫酸钠（Na2SO4）：分析纯，650 ℃灼烧4 h, 在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。

4.2 溶液配制

4.2.1 正己烷-乙mi(8+2)：取800 mL正己烷，加入200 mL乙mi，摇匀备用。

4.2.2 乙腈-甲苯(7+3)：取700 mL乙腈，加入300 mL甲苯，摇匀备用。

4.3 标准品

4.3.1 氟硅唑（Flusilazole, C16H15F2N3 Si，CAS No:85509-19-9,分子量为315）标准物质：纯度>99%。

4.4 标准溶液配制

4.4.1 氟硅唑标准溶液：准确称取适量的氟硅唑标准物质，用乙腈配成浓度为100 μg/mL的标准储备液。根据需要用乙腈稀释至适当浓度的标准工作液。标准储备液在0 ℃～4 ℃冰箱中保存，有效期为12个月，标准工作液在0 ℃～4 ℃冰箱中保存，有效期为6个月。

4.5 材料

4.5.1 石墨化碳黑固相萃取柱：Envi-Carb，6 mL，500 mg 或相当者。

4.5.2 氨基固相萃取柱：Sep-Pak，3 mL,500 mg 或相当者。

4.5.3 弗罗里硅土固相萃取柱：LC-Florisil, 6 mL，1 g 或相当者。加样前先用5 mL正己烷-乙mi(8+2)预淋洗柱。

4.5.4 串联柱：在石墨化碳黑固相萃取柱中加入约20 mm 高无水硫酸钠,将该柱连接在氨基固相萃取柱顶部，加样前先用5 mL乙腈-甲苯(7+3) 预淋洗柱。

5 仪器和设备

5.1 气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）。

5.2 分析天平：感量0.01 g 和0.0001 g。

5.3 离心机：转速大于5 000 r/mi。

5.4 氮吹仪。

5.5 旋转蒸发器。

5.6 均质器。

5.7 固相萃取装置。

5.8 多功能食品搅拌机。

5.9 粉碎机。

5.10 旋涡混合器。

6 试样制备与保存

6.1 茶叶、粮谷类

取代表性样品约500 g，经粉碎机粉碎并通过2.0 mm 圆孔筛，混匀，装入洁净容器内密封，标明标记。

6.2 蔬菜、水果及坚果类

取代表性样品约500 g，切碎，经多功能食品搅拌机充分捣碎均匀，装入洁净容器内密封，标明标记。

6.3 畜、禽、水产品类

取代表性样品约500 g，切碎后，用多功能食品搅拌机充分捣碎均匀，装入洁净容器内密封，标明标记。

6.4 蜂产品类

取代表性样品约500 g，未结晶的样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出的样品可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热，等样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器内密封，并标明标记。

茶叶、粮谷、蜂产品、坚果类等试样于4℃以下保存；蔬菜、水果、畜、禽、水产品类等试样于-18℃以下保存。在制样过程中，应防止样品受到污染或发生氟硅唑残留量的变化。

注：以上样品取样部位按GB 2763附录A执行。

7 分析步骤

7.1 提取

粮谷、坚果和茶叶：称取5 g（茶叶称取2 g）（精确至0.01 g）试样于50 mL离心管中，加5 mL水放置0.5 h。

蔬菜、水果、肉类和蜂蜜：称取5 g（精确至0.01 g）试样于50 mL 离心管中，加水5 mL 混匀。

加入20 mL乙腈，以10 000 r/min均质0.5 min（蜂蜜仅需涡旋混匀2 min），加入5 g氯化钠，摇匀，并于4 000 r/min离心3 min。吸取上层有机相于浓缩瓶中，残渣中加入15 mL乙腈，重复提取一次，合并上层有机相，在45℃水浴中减压浓缩至近干。准确加入5.0 mL乙腈-甲苯(7+3，体积比)（水果、蔬菜）或正己烷-乙mi(8+2，体积比)（粮谷、坚果、茶叶、肉类和蜂蜜）溶解残渣，供固相萃取柱净化。

7.2 净化

7.2.1 水果、蔬菜

准确移取2.5 mL提取液入串联柱中，用乙腈-甲苯(7+3)洗脱，流速为2 mL/min，收集10 mL洗脱液于10 mL玻璃离心管中，在45℃以下水浴用氮吹仪吹干，加入0.5 mL乙腈溶解并定容，供气相色谱-质谱测定。

7.2.2 粮谷、坚果、肉类、茶叶和蜂蜜

准确移取2.5 mL 提取液入弗罗里硅土固相萃取柱中，用15 mL 正己烷-乙mi(8+2，体积比)淋洗，流速为2 mL/min，弃去淋洗液。用正己烷-乙mi（3+7，体积比）洗脱，收集10 mL 洗脱液于10 mL 玻璃离心管中，在45℃以下水浴用氮吹仪吹干，加入0.5 mL 乙腈溶解并定容，供气相色谱-质谱测定。

7.3 测定

7.3.1 气相色谱-质谱参考条件

a) 色谱柱：DB-5ms 石英毛细管柱，30 m×0.25 mm （i.d）×0.25 μm，或相当者。

b) 色谱柱温度：70 ℃（1 min） 20 ℃/min  300 ℃ (10 min )。

c) 进样口温度: 280 ℃。

d) 接口温度：280 ℃。

e) 载气：氦气，纯度大于等于99.999%。流速：1.0 mL/min。

f) 进样量：2μL。

g) 进样方式：脉冲不分流进样，脉冲压力25 psi, 延时0.75 min, 0.75 min 后开阀。

h) 溶剂延迟时间：8 min。

i) 离子源：电子轰击源（EI）。

j) 电离能量：70 eV。

k) 检测方式：选择离子监测方式。

l) 选择离子及相对丰度：见表1

表1 选择离子和相对丰度

7.3.2 定量测定

根据样液中氟硅唑含量的情况，选定与样液中氟硅唑浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟硅唑响应值应在仪器检测的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下，氟硅唑的保留时间约为11.0 mim，标准品的总离子流色谱图参见附录A 中图A.1 。

7.3.3 定性测定

对标准溶液及样液均按6.3.1 规定的条件进行检测，如果样液与标准溶液在相同的保留时间有峰出现，则对其进行质谱确证，在扣除背景后的样品谱图中，所选择离子全部出现，同时所选择的离子的离子丰度比与标准品相关离子的相对丰度一致，波动范围符合表2 的最大容许偏差之内（见表2），可判定样品中存在氟硅唑。被确证的样品可判定为氟硅唑阳性检出。氟硅唑标准品的质谱图参见附录A 中图A.2。

表2 质谱相对离子丰度最大容许偏差

7.4 空白试验

除不加试样外，均按上述检测步骤进行。

8 结果计算

用色谱数据处理软件或按式（1）计算试样中氟硅唑的残留含量：

式中：

X —— 试样中氟硅唑残留量，单位为毫克每千克mg/kg；

A —— 样液中氟硅唑的峰面积；

c —— 标准工作液中氟硅唑的浓度，单位为微克每毫升μg/mL；

V —— 最终样液定容体积，单位为毫升mL；

AS —— 标准工作液中氟硅唑峰面积；

m —— 最终样液所代表的试样量，单位为克g。

注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。

9 精密度

9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合

附录C的要求。

9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D 的要求。

10 定量限和回收率

10.1 定量限

本方法的定量限为：0.01 mg/kg 。

10.2 回收率

样品的添加浓度及回收率和精密度的实验数据见附录B。