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GUS染色液的染色原理

来源:北京索莱宝科技有限公司   2022年07月29日 16:46  
  GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶,该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。GUS染色的实验目的是对植物样本进行染色,因为绝大多数植物细胞内不存在内源GUS活性,因此GUS基因广泛用作转基因植物的报告基因。
 
  GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)的简称。GUS染色液染色原理是适宜的反应条件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质,该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质,具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点,可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色,多用于转基因植物的GUS基因表达分析。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
 
  GUS染色液使用注意事项:
 
  用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。例如,拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。

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