赛默飞色谱柱选择时要掌握色谱柱的主要关键参数

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来源：广州太玮生物科技有限公司 2022年07月23日 15:52

　　赛默飞色谱柱选择时要掌握色谱柱的主要关键参数，色谱柱的保护，色谱分析理论以及色谱柱的分类等知识，分析工作者才能做到在工作开展时一针见血的选择色谱柱，有的放失的开发方法，后心中有数的完成分析工作。

　　赛默飞色谱柱的关键参数有固定相、内径，长度和液膜的厚度。

　　1）固定相

　　固定相由固体吸附剂或涂有固定液的担体构成。担体是一种多孔性化学惰性固体，用来支撑固定液。担体的特性是表面积大、有化学惰性、热稳定性，孔隙结构和浸润性。担体分为一般分硅藻土和非硅藻土两大类。

　　固定相一般是具有活性的多孔性固体的物质，主要有三类：吸附、高分子聚合物、化学健合固定相，由固定液涂敷在载体表面上。

　　常用的赛默飞色谱柱是化学健合固定相，主要是聚氧硅氧烷和聚乙二醇。选择这类色谱柱理论上遵循相似性原则，即非极性固定相分析非相性物质，极性固定相分析极性物质，含芳香基团的固定相分析芳香物质。这类固定相与分析物之间存在三种作用力：色散力、偶极力和氢键作用力。

　　2）内径

　　毛细管柱的内径直接影响到理论塔板数、分离度、保留时间和柱头压力等参数。

　　由理论公式可以得到，柱子内径大小与柱效成反比，分离度与理论塔板数的平方根成正比，分析物的保留时间与柱子内径成反比，柱头压力是柱内径的负二次方函数，载气的流量设置也会根据柱内径进行优化。

　　柱子内径常规有0.18 mm、0.25 mm、0.32 mm、0.53 mm，小内径有较高的理论塔板数，但也会有较高的柱头压力。高载气流速时使用大内径的柱子，同时也会有较高的样品容量。

　　3）液膜厚度

　　柱子液膜厚度影响分析物的保留特性、分离度、流失、惰性和容量。

　　一般情况，液膜厚度与保留时间成正比，对于低沸点的分析物，厚度越大保留越强。液膜厚度大的毛细管柱流失水平也高，同时惰性也强，使用较厚度液膜的柱子可以减少峰拖尾。

　　常规的液膜厚度有0.12μm、0.4μm、1.2μm、5.0μm，对于0.18~0.32mm 内径的毛细管柱，一般膜厚为0.18~ 0.25μm，适用于大多数样品分析。对于0.45~0.53mm 内径的毛细管柱，一般膜厚为0.8~1.5μm，适用于大多数样品分析。

　　4）长度

　　毛细管长度会影响柱效、分离度、保留时间和载气压力。柱子长度与理论塔板数成正比，理论上增加柱子长度可以增加分离度，也会增加保留时间。柱子的压力与长度成正比。

　　15m长的毛细管柱用于简单分析物的分析，30m长的毛细管柱可以用于30-50个组成的分析，更复杂的分析物可用大于50m毛细管柱。

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