色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对糖和有机酸分析色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
糖和有机酸分析色谱柱是高效液相分离系统的中重要的环节,根据极性分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还C8,C4,C2和苯基柱等。
今天要与大家分享的是糖和有机酸分析色谱柱的操作方法,希望能够帮助到大家:
1、在条件允许情况下,在使用前对新色谱柱按照说明书方法进行柱效测试,以确保其正常使用。
2、所有产品使用温度应低于60℃。
3、将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度洗脱,则需要将样品溶解在初始流动相或极性相近的溶剂中。样品溶液不应含有任何颗粒物,使用0.5μm或更小粒径的滤膜过滤。样品溶液如果使用强溶剂,为达到较好峰形,需要降低进样量。
4、所有流动相,特别是含有缓冲盐的流动相,当日实验当日配制;如果使用了前日配制的流动相,请确保流动相pH值没有变化,并确保流动相没有长菌。流动相的pH值取决于您的应用和色谱柱填料类型。
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