默克色谱柱的活化实际上是一个平衡的过程。激活前,您必须查看包装中的配套说明,并核实色谱柱中储存的溶剂和推荐的激活步骤。如果没有推荐的步骤,请参考以下激活步骤:
默克色谱柱
1、反相柱活化过程:
(1)用甲醇或乙腈清洗20倍柱体积;
(2)如果流动相中含有缓冲盐,用超纯水和有机相按与流动相中盐的比例,20倍柱体积的量冲洗过渡,然后用流动相平衡色谱柱含缓冲盐,用量为柱体积的20倍以上;
(3)如果流动相不含缓冲盐,用流动相平衡色谱柱,用量为柱体积的20倍以上;
(4)压力基线稳定。如果不稳定,可以延长平衡时间。
(保存溶剂为正相溶剂时:
如果使用正相溶剂作为流动相,可以用正相流动相洗涤20倍体积。一般用异丙醇以0.2ml/min的流速冲洗50倍体积,然后用流动相(乙腈/水)平衡50倍体积。
保存溶剂为反相体系时:
如果使用反相体系作为流动相,可用反相溶剂洗涤20倍体积后使用。如果用正相体系做流动相,用异丙醇以0.2ml/min的流速冲洗50倍体积,然后用正相流动相平衡50倍体积。
2、默克色谱柱的维护:
(1)色谱柱应轻拿轻放,避免碰撞和振动。放回时,应由相应的操作人员确认存放在合适的溶剂中,色谱柱两端的塞子已拧紧。
(2)色谱柱压力升高时,应按步骤进行保养,色谱柱的保养应在色谱柱档案的备注中注明。
(3)色谱柱峰高降低时,峰宽增加,或肩峰和柱效降低。色谱柱的再生按原则进行,色谱柱的再生应在色谱柱档案的备注中注明。
(4)默克色谱柱维护再生后,柱效、柱压仍达不到要求的,应向相关负责人报告。负责人经评价认为确需报废的,应当将报废记录记入色谱柱档案,并对报废的色谱柱进行专门存放,以便对污染严重的色谱柱进行维修。
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