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感受态，是指宿主细胞最容易接受外源基因并实现将其转化的一种生理状态，它是由受体菌的遗传性状所决定的，同时也受菌龄以及外界环境因子的影响， 比如Ca2+就可以大大促进转化的作用。细胞的感受态一般出现在对数生长期，新鲜幼嫩的细胞是制备感受态细胞和进行成功转化的关键。
制备感受态细胞的方法是用预冷的CaCl2处理对数生长期的细菌，即用低渗CaCl2溶液在低温（0℃）时处理快速生长（进入对数生长期）的细菌，从而获得感受态细胞。此时细胞膨胀成球形，外源DNA分子在低温条件下易形成抗DNA酶的羟基－钙磷酸复合物粘附在细胞表面，通过热激处理促进细胞对外源DNA分子的吸收。转化效率非常高。此方法的关键在于选用的细胞必须处于对数生长期，实验操作必须在低温无菌环境下进行。
仪器：超净工作台，摇床，高压灭菌锅，培养箱，制冰机，超低温冰箱，离心机，接种环，试管，摇瓶（2L），平板，移液枪，枪头，离心管(500mL),EP管(1.5mL),蓝盖瓶，泡沫箱
试剂：CaCl2溶液：PIPES 1.51g，CaCl2•2H2O 4.41g，甘油 75ml，pH=7.0，定容至500ml。
LB培养基（固体、液体）：Tryptone 1.00g，Yeast 0.50g，NaCl 1.00g，定容至100ml。（固体培养基加入1.5%的琼脂）
抗性：卡那霉素，氨卞青霉素，氯霉素，四环素。
材料：感受态菌株
取－80℃冻存的感受态菌株，用接种环划线分离接种于固体平板上（平板抗性根据感受态选择），做好标记，倒置于37℃培养箱培养过夜。 第二天，从平板上挑取单个菌落，接种至含有4ml LB培养液（抗性根据感受态选择）的试管中，37℃,195rpm，震荡培养过夜。次日取菌液4ml接种至含有400ml LB培养基（抗性根据感受态选择）的2L摇瓶中，37℃，200rpm震荡培养约2-3小时。 当菌落OD600nm值达到0.3－0.5时，将摇瓶取出放置于冰上10-15min。在无菌条件下把菌液倒入500ml的预冷的离心管中，离心4℃,3000r，8min。 弃去上清，加入约200ml的预冷的CaCl2溶液，吹打混匀，悬浮菌体，放入冰浴30min。 离心4℃,3000r，8min，弃去上清，加入约8ml预冷的CaCl2溶液，重新悬浮菌体。 将用CaCl2溶液处理后的菌体分装于1.5ml的EP管中，每管110ul，保存于-80℃的超低温冰箱中。
随机取1支本次制备的感受态细胞，转化一个以前转化成功的质粒，从转化平板上的菌落数及表达鉴定的SDS-PAGE电泳图(看是否出现其他的杂带及蛋白表达情况)判断感受态的效价。如果效价好，这批感受可以用；否则，要重新制备。
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