手机版
化工仪器网手机版
化工仪器网小程序
官方微信
公众号：chem17
扫码关注视频号
RNA提取试剂盒用于从细胞、组织、新鲜血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA，用LB10裂解样品后，加入氯仿，溶液分为无色水相和粉红色有机相，RNA在水相中；用RNA硅胶膜离心柱特异地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA），流出液中的smallRNA用miRNA硅胶膜离心柱特异地吸附。与其它miRNA提取方法相比，该试剂盒裂解能力强、提取量高、专一性强，应用范围广。
RNA提取试剂盒的提取步骤：
1、将处理后的样品在室温静置5~10分钟，使得核酸蛋白复合物*分离。
2、可选步骤：在4°C12,000rpm离心10分钟，取上清转入一个新的RNasefree的离心管中。（当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要额外的分离步骤。）
3、每1ml裂解液RL加200μl氯仿。盖紧样品管盖，剧烈振荡15秒并将其在室温下静置3分钟。
4、4°C12,000rpm离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上清水相层，RNA存在于上清水相层中。
5、将上清水相转入新的离心管中，加入0.5倍上清水相体积的无水乙醇，立即吹打混匀。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能会黏附在枪头的外壁，注意不能将其带入离心管中。）
6、将混合溶液（每次小于700μl，）转入套有吸附柱AC的离心管中，12,000rpm离心45秒，弃掉废液。
7、加500μl去蛋白液RE，12,000rpm离心45秒，弃掉废液。
8、加500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm离心45秒，弃掉废液。
9、重复步骤8一次。
10、将吸附柱RA放回收集管中，13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11、取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase-free离心管中，在吸附膜的中间部位加50~80μlRNase-freeH2O，室温静置2分钟，12,000rpm离心1分钟。洗脱后的RNA可立即使用或保存在－80°C。
免责声明
- 凡本网注明“来源：化工仪器网”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。
采购中心
