细胞培养基pH值改变的原因及解决办法

来源：重庆市华雅干细胞技术有限公司 2022年04月12日 14:42

pH值升高都有哪些原因？

①随着培养基开盖时间的增长，pH值会不断升高；

---培养基中CO2挥发，导致溶液碱性升高。

②培养基存储条件不合适；

③操作时间过长。

如何解决pH值升高的问题？

①*培养基尽量现配现用，2~8℃下保存一周内使用完；

②培养基在2~8℃下避光保存；

③避免操作时间过长。操作时间快速、减少同时进行的实验数量。

pH值降低都有哪些原因？

①在细胞生长过程中，产生细胞代谢产物乳酸，乳酸蓄积，pH值通常会下降；

②培养瓶盖拧得过紧；

---细胞代谢产生的CO2无法溢出，溶解于培养基中导致酸性变强。

③NaHCO3缓冲系统缓冲能力不够；

④细菌、酵母或真菌污染等。

如何解决pH值降低的问题？

①及时传代、提高传代比例或降低血清量；

②适当松开瓶盖；

③增加培养液中NaHCO3浓度或减少培养箱内CO2浓度（NaHCO3含量在2.0g/L到3.7g/L之间时，对应的CO2浓度为5~10%）；

④若是微生物污染造成的，需及时丢弃培养基，并对操作、培养空间进行消毒处理。

在什么情况下选择HEPES缓冲体系呢？

在开放式培养条件下（非5%CO2的培养环境），细胞代谢产生的CO2迅速溢出，pH迅速升高，使用HEPES缓冲液体系，可以防止培养基pH值迅速变动。

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