氨基酸分析色谱柱的活化及维护方法介绍

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来源：岛津(上海)实验器材有限公司 SGLC 2022年03月22日 14:23

　　氨基酸是构成蛋白质的基本单位，是生物、卫生、农牧业、食品、饮料及饲料等行业生产和科研中的分析测试项目，并且随着相关行业标准的制定和完善，氨基酸的定性和定量分析将成为企业的检测项目。

　　由于氨基酸种类较多，结构接近，没有紫外或荧光响应，使得氨基酸分析一直是高效液相色谱领域较难解决的问题之一。针对国内科研与生产单位的实际需要，开发了氨基酸分析色谱柱。

　　氨基酸分析色谱柱技术包括填料技术和装柱技术，填料技术自不待言，填料的好坏对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响。装柱技术也没有想象中的这么简单，不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度，装柱工艺都有所不同，要装出紧密、稳定、均一的柱床，更多是一门艺术，需要经验积累。

　　高效液相色谱分析中，氨基酸分析色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的产品可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱；对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱，以改善峰形，延长其使用寿命等。

　　拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护？为什么要这样做？

　　新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。

　　具体平衡方式也很简单，多进几次样品，直到峰面积和保留时间稳定，再进行正式进样测定。如果要加快平衡时间，把前面用来平衡的进样样品浓度加大，或者不等洗脱完成，连续进样多针。用待测物对新柱平衡，目的是将硅胶基质填料表面具有非特异性吸附的位点的吸附能力饱和掉。

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