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赛默飞CAD设计原理与特点

来源:赛默飞色谱及质谱   2022年03月17日 11:27  

CAD电喷雾检测器是一款设计*、技术先进、灵敏度高、且重现性较好的通用型检测器,能准确的用于定量或半定量,能检测到大部分非挥发性和半挥发性的化合物。CAD 的两款型号,见图 1 所示。CAD 的工作过程(见图 2 所示):HPLC 洗脱液经与雾化器中氮气碰撞作用而雾化,其中较大的液滴经废液管流出,较小的溶质 ( 分析物 ) 液滴在室温下干燥,形成溶质颗粒。同时,用于载气的氮气分流形成的第二股氮气流经过电晕式装置 ( 含高压铂金丝电极 )形成带正电荷的氮气颗粒,与溶质颗粒反向相遇时经碰撞使溶质颗粒带上正电。为了消除由带有过多正电荷的氮气所引起的背景电流,在含溶质颗粒的气流流入静电检测计之前,通过一种称之为离子阱的装置(带有低负电压)使迁移率较大的颗粒(即粒度较小的氮气颗粒)的电荷中和,而迁移率小的带电颗粒把它们的电荷转移给一个颗粒收集器,最后用一个高灵敏度的静电检测计测出带电溶质的信号电流。由此产生的信号电流与溶质(分析物质)的含量成正比。

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CAD的分析步骤如下: 

第一步:雾化与干燥HPLC 洗脱液进入 CAD 雾化室,在氮气作用下,进行雾化去溶剂,使洗脱液中的目标化合物变成颗粒,颗粒量的多少与进入雾化室的目标化合物质量有关。没有雾化完的大液滴直接进入废液管,雾化完的超细小液滴进入干燥管,因其粒径较小,所含溶剂在此被迅速蒸发,干燥后的目标化合物颗粒随气流直接进入混合腔。因此,和大多数基于雾化原理的检测器一样,CAD 雾化效率也受流动相中有机相含量的影响显著,当有机相比例逐渐增加时,雾化效率增加,响应值也随之增加,当有机相比例达到 80% 时,雾化效率趋于稳定。 

第二步:使目标颗粒物带电另一路氮气经过高压电晕放电针,变成带正电的氮气,在碰撞室与干燥的目标化合物颗粒进行正交碰撞后,电荷随之被转移到目标化合物颗粒表面,因此,如果颗粒物越大,球面积也越大,带电量也就越多。经过碰撞后,带电颗粒和多余的带电氮气离开碰撞室,其中,速度较快的带电氮气在迁移途中被低压离子阱捕集移除,而迁移速度较慢的多电荷目标化合物颗粒则通过后端的离子捕集阱,并撞向一个颗粒物过滤网。 

第三步:检测带电目标化合物颗粒物撞击收集器后,把电荷转移到过滤网上,由此产生的电流将被高灵敏度的静电计探测到,并被放大输出至到检测器,最终产生的信号强度与目标化合物的量成比例。离子肼可以捕集多余带电氮气,从而降低背景电流,因此,即使很少的电荷也能被检测器检测到,使得 CAD 的检出限较低,灵敏度较高。


同时,由于 CAD 的响应不依赖于化合物的结构,其对大部分的化合物的响应因子也基本一致。蒸发光散射检测器由于其散射受到化合物的空间结构的影响,即使是同分异构体,同样的浓度其响应值也会出现较大的差异。CAD 的主要特点:1)基于该检测器的设计原理与结构,该检测器灵敏度高,如在分析葡萄糖、蔗糖和乳糖时,能检测到 0.5 ng 的柱上样量;2)响应因子一致,不依赖于化合物结构,重现性非常好,如对 24 种化合物在相同色谱条件下分别直接进样 1 µg(不接色谱柱),其响应的峰面积的 RSD 值仅为 10.7%;3)动态检测范围宽,达 3-4个数量级;4)应用较广泛,能分析小分子、大分子化合物,如氨基酸、蛋白、聚合物等;5)使用操作直观简单,维护十分简便,工作流速 0.2-2.0 mL/min,*兼容 UHPLC 超快速分析。CAD 使用注意事项:CAD 由于需要对流动相进行雾化,所以当需要使用酸或盐来调节流动相时要使用挥发性的酸和盐,如甲酸、乙酸等,有机盐建议使用铵盐;pH 值范围建议 2-7.5,更高的 pH 值可能会增加背景和噪音值。

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