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细胞摇瓶中的悬浮细胞需要消化吗

来源:洛阳富道细胞工程技术有限公司   2022年03月09日 08:50  

细胞摇瓶是培养悬浮细胞常用的一种细胞培养耗材,不同于贴壁细胞,悬浮细胞不依赖于支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长。在细胞传代前首先要消化细胞,那么,如何消化悬浮细胞呢?

125ml细胞摇瓶

三角细胞摇瓶125ml

从悬浮细胞的定义上来说,悬浮细胞是不贴壁的,所以它不需要酶的作用就可以使其从细胞摇瓶表面脱离。一般实验室中常用直接传代法和离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)来处理悬浮细胞,当我们观察到悬浮细胞已经长满至 80%~90%(细胞悬液变黄)的时候,细胞就可以进行传代操作了。

500ml细胞摇瓶

三角细胞摇瓶500ml

从显微镜下观察,如果没有细胞碎片、细胞形态规则,就可以选择直接传代法。将原瓶中的培养基按比例分装到新的培养瓶中,然后补加新鲜培养基,然后隔天观察细胞密度来考虑是否需要补液。如果从显微镜下观察细胞状态较差时,则需要使用离心传代法,首先,将细胞悬液转移到离心管内,1000rpm 离心 5 min;然后弃去上层清液,轻轻地将细胞沉淀弹散,使用新鲜的培养基重悬细胞;用吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。


PETG血清培养基瓶

由于悬浮细胞自身的特点,所以细胞摇瓶中的细胞进行传代前不需要消化,根据细胞生长状态选择直接传代法或离心传代法进行操作就可以了。


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