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ELISA试剂盒操作问题集锦,你不会的都在这里了
试剂盒是我们实验室常见的耗材之一，就好每天都在用的试剂盒可能是影响你实验的关键因素。试剂盒使用有哪些需要注意的跟小析姐一起来看看吧。
试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISAKit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等;ELISA试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗体ELISA检测,自从60-70年代问世以来,得到科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
为了保证ELISA试剂盒实验质量,我们需要掌握一些小技巧以助于实验的成功,那么ELISA试剂盒的操作技巧您知道吗?
如若掌握了这些实验技巧之后,在做ELISA实验中,试验起来会更熟练,大大的降低了实验过程中的风险,ELISA试剂盒实验的入门新手掌握了这些知识后,操作起来都会快的多。
ELISA试剂盒17个相关操作技巧如下:
1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。
17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
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