我们已经了解了造成色谱柱内径数字不是整数的原因,刚才我们稍稍提过一下,小内径色谱柱的出现是出于溶剂节省和质谱兼容性的原因,那么大家会问,既然小内径色谱柱有这些好处,为啥还没有取代大内径的色谱柱?下面来大概解释一下吧:
1、大内径色谱柱可以承载更大的上样量
利用这个特性,我们可以进行色谱制备纯化,用很大内径的色谱柱,一次进样就可以纯化很多样品,还是用汽车做个例子,大公交比小面包可以装更多的人。
2、大内径的色谱柱有更好的抗“溶剂效应”能力
通常即使溶剂兼容性不是那么好的情况下,大内径色谱柱更容易得到更好的峰型。
3、大内径色谱柱对仪器的系统扩散耐受能力较强
由于使用较高流速分析,大内径色谱柱由于仪器死体积造成的柱效损失会更小,而小内径色谱柱对死体积格外敏感,这也是是为什么现在的窄径柱(内径小于等于2.1mm)都推荐使用在高性能的UHPLC仪器上的原因。
4、大内径对仪器的延迟体积影响相对不太敏感
主要也是由于使用高流速,可以尽量抵消延迟体积带来的影响。
5、大内径可获得更高流速
对于某些型号的仪器以及某些特殊的方法,高流速下容易获得更好的混合精准度,这主要是由于仪器的硬件性能限制导致的。
所以呢,色谱柱内径大小的选择和使用,*是要根据自己实际需要来选择的,在某方面表现好,必然会有某方面的牺牲,尺有所短寸有所长,根据自己的仪器方法和实际需要选择合适内径的色谱柱才是正道。
最后,至于UHPLC为什么会导致老范的对钩变型,这是个挺复杂的问题,光靠老范画的对钩已经无法解释了,还得把他编的公式也拿出来,这个,作为后话吧...
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