婴幼儿配方奶粉中核苷酸含量测定
婴幼儿奶粉中核苷酸的检测
样品制备:
精密称取奶粉 5.0 g,加适量温水,超声 10 min 使溶解,加 10%醋酸溶液 5 mL,摇匀,静置,再加水定容至 50 mL,摇匀,过滤,取上清液待用。
样品净化:
SPE 小柱:Polyclean X-HLB 60mg/3mL(货号:9B-P001-06030)
活化:甲醇 3 mL
平衡:水 3 mL
上样:2 mL 待净化液
冲洗:20%甲醇/水溶液 3 mL
合并上样流出液与冲洗流出液,再加水定容至 5 mL,作为待测溶液。
HPLC 测定:
色谱柱:Titank C18 5μm 250×4.6mm (货号: FMG-5560-EONU)
流动相:0.1 M K2HPO4 溶液(用磷酸调节 pH 值至 5.6)为流动相A;乙腈为流动相B
流 速 :1 mL/min
进样体积:5 μL
检测波长:260 nm
温度:常温
梯度:
时间(分钟) | 流动相 A(%) | 流动相 B(%) |
0 | 100 | 0 |
8 | 100 | 0 |
25 | 95 | 5 |
27 | 75 | 25 |
40 | 75 | 25 |
5 种核苷酸混标图谱
Polyclean X-HLB 净化后婴儿配方奶粉图谱
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