【FACSCelesta实验应用系列】之全血NKT检测

来源：北京众仁鑫商贸有限公司 2021年11月05日 11:11

【实验概述】

NKT细胞是一类新型的免疫调节细胞，在外周血中比例极低，但NKT细胞能增强免疫反应，在抗肿瘤、抗感染、抑制自身免疫病及移植耐受中可发挥重要作用，因此人全血NKT的检测在疾病诊断中具有重要作用，流式细胞仪是检测NKT最佳方法之一，且NKT在全血中比例较低，全血不破红直接检测NKT同时也是判断流式细胞仪检测极低含量细胞能力的实验方法之一。

【实验方法】

①/ 仪器配置

Flow cytometer	Laser
FACSCelesta	488nm Blue Laser 640nm Red Laser

②/ 配色方案及流式试剂

● 配色方案

CD3	CD56	CD45	CD235a
FITC	PE	PerCP-Cy5.5	APC

● 流式试剂

Products Name	Catalog No.	Clone	Size	Vol.per.Test
BD Pharmingen™ FITC Mouse Anti-Human CD3	555332	UCHT1	100 Test	5ul
BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human CD56	555516	B159	100 Test	5ul
BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Mouse Anti-Human CD45	564105	HI30	100 Test	5ul
BD Pharmingen™ APC Mouse Anti-Human CD235a	551336	GA-R2 (HIR2)	0.1 mg	20ul/100ul Whole Blood
BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer (10x )	555899		100ml

【实验结果】

人全血中红细胞比例最高，可用对应抗体CD235a将其区分，而NKT比例低，在此样本中，NKT群与其他细胞群区分明显，可清楚区分开，其比例约为万分之一，需收集bai万级别的细胞数，但因红细胞数目众多，以低速（14ul/min）的上样速度上样，检测速度即可达到18000 events/s左右，所以此试验同时也验证了流式细胞仪在高速高浓度样本的检测中的液流稳定性及信号丢失率。

* 本资料仅限科研用途使用

免责声明

凡本网注明“来源：化工仪器网”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：化工仪器网”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
本网转载并注明自其他来源（非化工仪器网）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。

【FACSCelesta实验应用系列】之全血NKT检测

免责声明

联系我们

关注我们