细胞培养之“黑胶虫”的防治

“黑胶虫”/“Nanobacteria”究竟是何方神圣？《生物化学与生物物理进展》杂志（PIBB）2020年第1期发表了题为细胞培养中“黑胶虫”污染的检测及防治一文。根据作者描述，“黑胶虫”污染具有以下特征：

1. 培养基和正常培养基没有区别；

2. 低倍镜下它是黑色的点点和细胞碎片没有区别

3. 高倍镜下它会做运动给你看，也能模仿细胞碎片和细胞分泌物的布朗运动。还有黑胶虫“路痴”到处跑的。

4. 与细胞的数量成反比，细胞越多，它越少，细胞越少它越多

5. 细胞状态越养越差。

该科研成果除了得出这些结论外，还成功的鉴定出“黑胶虫”为缺陷短波单胞菌属新菌株，连名字都有了叫：Brevundimonas sp. GYBL3。

当然也有实验结果表示：初感染黑胶虫对细胞和实验都没有影响，但是后续细胞生长越来越慢，甚至停滞不长，黑点越来越多，直到细胞“全军覆没”。

黑胶虫的防治：

1、尽量使用好的血清，但是好的血清一般价格高的离谱，经济条件不允许，也可以选用进口新生牛血清代替。建议如果使用的是好的血清可不必灭活，这样可以减少“小黑点”的形成。

2、如果是贴壁细胞的话，可用无菌的PBS洗几次，可一定程度上缓解。若是悬浮的话，就不太好处理啦，可以向其中少加一点滋养细胞。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效！要是复苏很久的细胞，那就用PBS反复离心几次 ，一般建议是800-1000转3分钟， 离心2到3次，重新种植，加四环素等抗黑胶虫的药物进行抑制，让细胞尽快长起来，黑胶虫就消失了。

3、换用信得过的塑料培养瓶。

4、停止复苏，停止养细胞，*消毒所有用于细胞培养的一切用品，包括所用的培养瓶，培养基，吸管，胰酶，孵箱，超净台、空间等等你能想到的和细胞培养相关的所有物品，当然也别忘了您的白大褂。

5、如果有其它可用的细胞，那么污染的细胞最好扔掉；如没有，可试着用氯霉素 ，红霉素，或四环素进行抑制，或选用黑胶虫抑制剂。

6、minocycline具有抑制的作用，可以在换液的时候使用。由于黑胶虫尚未明确鉴定出是什么生物，所以上述的处理方法不一定正确，可以供考虑采用。