体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质无任何抵抗力,挑选血清是一个很艰难的决定,有些血清可能前期养细胞没有看到多大的问题,但是养着养着细胞突然暴毙,之前我们一直以为是细胞或者培养基的问题 ,后来给血清做完质谱之后,发现血清里含有的生长激素竟然是人体可以承受的几倍;以下我们分享一些挑选血清的细节:
首先,我们来看血清的成分及主要作用:
(1)提供基本营养物质
(2)提供贴壁和扩展因子
(3)提供激素及各种生长因子
(4)提供结合蛋白
(5)对培养中的细胞提供某些保护作用
怎么挑选血清:
判断血清质量首先从外观入手。
好的血清应该是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少量沉淀,比较粘稠。
如发现血清浑浊、不透明、含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白变性;
若血清呈棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,取材时有溶血现象;
如果摇晃时感觉液体稀薄,说明血清中掺入的生理盐水太多。
怎么储存和使用血清:
(1)使用前的处理 :大部分血清在使用之前必须经过灭活处理,即56℃放置30分钟。灭活的目的是去除血清中的补体成分,避免补体对细胞产生细胞毒作用,一句话基本价格在2500以下的最好都灭活处理
(2)储存条件 :血清一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融,避免反复冻融的办法就是分装保存,我司提供的胎牛血清适用于95%以上的细胞培养。
(3)血清使用浓度:使用浓度一般为5%~20%,较为常用的是10%。
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