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如何恢复HPLC色谱柱性能?

2021年09月15日 10:04   来源: 深圳市恒谱生科学仪器有限公司   
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  大家都知道HPLC色谱柱的寿命是有限的,在使用过程中随着时间的推移,其性能开始下降。你可以通过峰形和峰形之间的分离,柱背压的不规律增加以及重影峰的出现来判断HPLC色谱柱的性能出现了下降。色谱柱是昂贵的色谱耗材,平常使用完毕后需要保养。如果色谱柱真的发生了性能下降,有什么方法可以恢复呢?
 
  首先,如果色谱柱由于过载或使用不兼容的流动相而结垢,是可以恢复的,但已经损坏的色谱柱或已经过使用寿命的色谱柱无法恢复,需要更换。
 
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色谱柱还原程序如下,供大家参考:
 
  反相柱
 
  反相分离是大多数HPLC分离中使用的主要操作模式。填料主要由C18,C4,CN,NH2和苯基固定相组成。建议以水-乙腈-异丙醇-庚烷-异丙醇-乙腈-流动相的顺序用10至20倍体积的溶剂洗脱
 
  正相柱(氨基,二醇,硝基,氨基固定相)
 
  用20倍体积的溶剂冲洗,按照庚烷-异丙醇-乙腈-水-异丙醇-庚烷的顺序。
 
  GPC / GFC色谱柱
 
  用5倍体 积且PH值为3的0.1%磷酸盐缓冲液冲洗。如果使用了保留力强的蛋白质,则使用从水到乙腈再到水的60分钟梯度液冲洗。
 
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  色谱柱在使用前都要对其性能进行考察,使用期间或放置一段时间后也要重新检查,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。柱性能指标包括在一定实验条件下(样品、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性,或分离度。进行柱效比较时,还要注意柱外效应是否有变化。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。
 
  恒谱生色谱柱柱管由不锈钢制成,不锈钢柱内壁多经过抛光,减小管壁效应,提高柱效,柱中填充键合硅胶或聚合物填料。色谱柱基于高纯硅胶,采用独特键合技术,具有优异的峰形,灵敏性好。基质金属含量低,对所有类型的分析物均表现完好峰形。机械强度高,稳定性好,质控严格,确保色谱柱性能和色谱柱的使用寿命。有多种尺寸规格可供选择以适应色谱工作者及其使用的不同需求。我们有专业的技术工程师团队为您的需求提供解决方案,欢迎前来咨询了解!
 
液相色谱柱-DSC_7740

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