淋巴细胞分离液分离原理和使用

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来源：上海微科生物技术有限公司 2021年09月10日 08:44

淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异，借助离心产生的重力加速度，进行细胞的分离纯化的常用试剂。常用的淋巴细胞分离液有Ficoll淋巴细胞分离液、Percoll淋巴细胞分离液。Ficoll与Percoll分离单个核细胞的方法均为密度梯度离心法。

分离原理：外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同，淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075~1.090之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。

淋巴细胞分离液的使用方法：

1、准备无菌的15ml离心管或锥形管；

2、加入淋巴细胞分离液3ml；（注意：淋巴细胞分离液使用前需恢复室温，18-25℃）

3、Hank~s液或PBS缓冲液1:1比列（如果全血样本粘稠，可适当增大比例）稀释抗凝过的全血样品。

4、小心沿着壁管，接近分离液层面，非常缓慢地加入新鲜的稀释过的全血样品在淋巴细胞分离液上面；（切记不要搅浑淋巴细胞分离液）

5、小心放进离心机（水平转子），4℃离心20-30分钟，速度为400g-1000g；（注意：离心机刹车应取消，需等待自然停止）

6、小心取出离管，切记不要震动；

7、可见上层为淡红色透明血浆，其次为薄薄的只密白色环，白色环卫单核细胞淋巴细胞。

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