活化部分凝血活酶时间（APTT）检测试剂盒产品说明书（中文版）

活化部分凝血活酶时间（APTT）检测试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

  活化部分凝血活酶时间（APTT）检测试剂是一种旨在通过脑磷脂和鞣花酸反应物，与血浆样品混合后，加入钙离子启动凝血反应，产生凝块，通过目测或凝血仪检测，来测定样品中凝块形成时间的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体血浆样品凝血系统的检测，以及凝血因子和抑制剂的的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time；APTT），又称为白陶土脑磷脂凝血时间（kaolin cephalin clotting time；KCCT），是指血浆在脑磷脂（缺乏组织因子的部分凝血活酶）、接触因子激活剂和钙离子等的参与下，形成纤维蛋白凝块（fibrin clot）所需的时间长度。其反映和检测血液系统内源性（intrinsic）又称为接触性激活通路（contact activation pathway）和常见（common）凝血通路或机制的生理或病理状况。内源性凝血通路或机制由凝血因子 8、9、11、12、前激肽释放酶（prekallikrein）、高分子激肽原（high molecular weight kininogen；HMWK）等构成；而常见通路由凝血因子1、2、5、10等组成。正常活化部分凝血活酶时间通常为25至40秒。活化部分凝血活酶时间用于筛选出血倾向的病人，即内源性凝血系统异常的病人；定量检测凝血因子2、5、8、9、10、11、12等差异和缺陷；检测血液病理性凝血抑制剂，例如狼疮抗凝物（lupus anticoagulant；LA）；监测肝素抗凝血疗法和凝血因子替代疗法。维生素K缺乏、弥散性血管内凝血（disseminated intravascular coagulation；DIC）、血管性血友病（Von Willebrand disease）、血友病（haemophilia）、遗传性无纤维蛋白原血症（congenital afibrinogenemia）、凝血因子缺陷、肝素、狼疮抗凝物等导致活化部分凝血活酶时间延长；而血栓性疾病则引起活化部分凝血活酶时间缩短。其检测方法在于使用血小板不足的血浆，血小板替代物磷脂（来自于兔脑、牛脑、大豆或脑磷脂等），接触因子激活剂包括白陶土（kaolin）、硅藻土（celite）、二氧化硅微粒（micronized silica），或鞣花酸（ellagic acid）等，混合在一起，加入钙离子后启动凝血反应。

产品内容

  抗凝液（Reagent A）        毫升

  反应液（Reagent B）          毫升

  催化液（Reagent C）          毫升

  标准液（Reagent D）          微升（另购）

产品说明书              1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；有效保证3月；  反应液（Reagent B）一旦启用，有效保证1周

用户自备

2毫升离心管：用于样品操作的容器

1.5毫升离心管：用于样品反应的容器

微型台式离心机：用于样品操作

培养箱或恒温水槽：用于反应物孵育

计时器：用于反应计时

比色皿：用于样品凝血仪测定的容器

凝血仪：用于样品凝块形成分析

实验步骤

一、 血浆制备

1． 准备好2毫升离心管

2． 加入xx微升  抗凝液（Reagent A） 

3． 抽取1.8毫升血液到含  抗凝液（Reagent A）的离心管

4． 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为3000g 

5． 小心移取上层黄色液体到新的2毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）

6． 即刻置于冰槽里备用（注意：2小时内使用）

二、 测定准备

1． 准备好上述制备的血浆样品

2． 设定好凝血仪并预热

3．   催化液（Reagent C）置于37℃恒温水槽均衡温度

三、 凝血测定（手工操作）

1． 准备好1个1.5毫升离心管

2． 移取xx微升  反应液（Reagent B）

3． 放进37℃培养箱里孵育1分钟

4． 加入100微升上述制备的待测样品，混匀

5． 放进37℃培养箱里孵育3分钟（注意：不宜超过5分钟）

6． 即刻加入xx微升  催化液（Reagent C）；同时开启计时器进行计时（注意：以秒计时）

7． 倾斜离心管观察凝块形成，直至液体凝固；同时关闭计时器结束计时

8． 正常参考范围：

手工操作：25至35秒

凝血仪操作：23至31秒

注意事项

1． 本产品为20次操作，包括标准对照测定

2． 本产品检测敏感度达0.01国际单位Factor VIII含量

3． 操作时，须戴手套

4． 血液采集，避免使用肝素、EDTA、草酸抗凝管

5． 样品避免溶血，采血避免损伤组织

6． 血浆中血小板含量大于10000/毫升，以及含有雌激素、苯妥英、沃法令、纳洛酮、肝素等则干扰检测

7． 血浆样品避免反复冻融：4℃环境维持4小时；－20℃维持2月；－80℃维持6月

8．   标准液（Reagent D）为标准对照血浆

9． 建议用户建立自己的正常参考值范围

10． 用户可以使用各种自动和半自动凝血仪：例如Electra 600等进行检测，按照仪器操作手册操作

11． 本公司提供系列血液凝集检测试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定检测敏感