钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物, 包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法,Leagene 钙盐染色液采用Von Kossa硝酸银法,其原理在于该法是一种金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。可用于显示未经脱钙处理的冰冻、石蜡包埋组织的钙盐染色,及及培养的成骨细胞的矿化结节染色。钙盐染色液的操作步骤:
1、组织固定于中性福尔马林或乙醇,常规脱水包埋。
2、切片至乙醇。
3、载玻片竖立放置,*风干。
4、切片入含茜素红S染色液的玻片染缸,浸染。
5、蒸馏水快速冲洗。
6、入固绿染色液复染。
7、蒸馏水冲洗。
8、常规脱水透明,中性树胶封固。
钙盐染色液的使用注意事项:
1、钙盐组织固定以中性福尔马林为佳。
2、作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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