基本原理
细胞冻存时保存细胞的最基本方法,当不加保护剂直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水会形成冰晶,从而引起细胞死亡。因此,正常情况下冻存细胞,通常会向培养液中加入保护剂,使用逐步降低温度的方法,以减少冻存过程中细胞内冰晶形成、保护细胞。
注意事项
1、冻存细胞选择细胞增殖旺盛、情况稳定、无污染、处于对数生长期的细胞。
2、实验操作过程必须遵循无菌操作。
3、细胞冻存液的配方应根据细胞的类型进行调整,摸索对应细胞最适的配方。
4、细胞冻存过程,降温速率要小,遵循慢冻原则,可借助程序降温盒来完成。
5、冻存细胞要做好标记,名称、日期、冻存人等。
6、选择质量好的冻存管进行细胞冻存,防止管冻裂。
7、冻存细胞前要进行细胞计数,建议一管中细胞数量为106。
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