琼脂糖凝胶电泳操作步骤
那么下面为大家简单介绍一下关于琼脂糖凝胶电泳涉及的步骤:
一. 为了制备凝胶,将琼脂糖粉与电泳缓冲液混合至所需浓度,并在微波炉中加热使其熔化。
琼脂糖凝胶浓度
1. 所用琼脂糖的百分比取决于要分离的片段的大小。
2. 琼脂糖的浓度是指琼脂糖相对于缓冲液体积的百分比(w / v),琼脂糖凝胶通常在0.2%至3%的范围内。
3. 琼脂糖浓度越低,DNA片段迁移越快。
4. 通常,如果目的是分离大的DNA片段,则应使用低浓度的琼脂糖,如果目的是分离小的DNA片段,则建议使用高浓度的琼脂糖。
二. 将溴化乙锭添加到凝胶中(**终浓度为0.5 ug / ml),以促进电泳后DNA的可视化。
三. 将溶液冷却至约60°C后,将其倒入装有样品梳子的浇铸盘中,使其在室温下固化。
四. 凝胶固化后,将梳子移开,注意不要撕裂孔的底部。
五. 仍在塑料托盘中的凝胶水平插入电泳仪并用缓冲液覆盖。
六. 然后将含有DNA与上样缓冲液混合的样品吸移到样品孔中,将盖子和电源线放在设备上,并施加电流。
七. 可以通过观察电极上的气泡确认电流。
八. 鉴于其负电荷,DNA将迁移至通常为红色的正电极。
九. DNA迁移到凝胶中的距离可以通过肉眼监测跟踪染料(如溴酚蓝和二甲苯氰染料)的迁移来判断。
相关产品
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。