客户向我们提供了地黄苷D标准品溶液(液体)、地黄饮片和熟地黄(固体粉末)。希望本实验室能够按照2020版《中国药典》中分析方法,筛选合适的色谱,使地黄饮片和熟地黄中地黄苷D与其前后相邻杂质之间的分离度能够达到基线分离,同时,地黄苷D峰的理论塔板数应满足药典要求(不低于5000)。
我们按照2020版《中国药典》熟地黄含量测定项下方法,对地黄饮片和熟地黄进行了提取处理,然后按照药典方法,
在CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱上得到了良好的分析结果。
首先,下图为使用CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱,对地黄苷D标准品的分析结果。
HPLC Conditions :
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d.×250 mm
流动相:0.1%磷酸/甲醇 = 95/5
流 速:1.0 mL/min
温 度:35°C
检 测:UV 203 nm
浓 度:客户提供
进样量:10 µL
结果中,地黄苷D的保留时间为28.135 min,理论塔板数为13067,满足药典不低于5000的要求,峰不对称因子为1.00,峰形良好。
随后,我们使用同样方法对熟地黄和地黄饮片的实际样品进行了分析,结果如下图所示:
HPLC Conditions :
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d.×250 mm
流动相:0.1%磷酸/甲醇 = 95/5
流 速:1.0 mL/min
温 度:35 °C
检 测:UV 203 nm
浓 度:样品按药典方法处理
进样量:10 µL
地黄饮片中地黄苷D与其前后相邻杂质之间的分离度分别为1.52和1.88,熟地黄中地黄苷D与其前后相邻杂质之间的分离度分别为1.65和1.89,均可以得到基线分离。
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