液相色谱仪是属于易学难用的仪器，特别讲究 “正确使用” 和经验。液相工作者接触最多的是流动相，流动相是造成液相色谱各种问题的主要源头。液相色谱仪*常见的故障一是堵，二是漏。

“

堵”的原因之一：配制流动相时细菌污染。

堵塞的主要位置就是在液相色谱仪色谱柱的前端，最主要原因就是流动相里有杂质，杂质的主要来源就是细菌。  

首先我们要认识到，一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理，直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质，也能在液相流路系统最前端的过滤头上排除，真正容易引起问题的，是水中的细菌。新制备的纯水在室内放置几天就会长菌，而这些细菌虽然肉眼不可见，却足以堵塞柱填料颗粒的空隙，造成柱子很快报废。时间过久,滤头黏附细菌导致泵液不准

解决液相色谱仪“堵”的方法很简单，就是确保水的可靠性。这里有两种方式推荐：

（1）理想的方式当然是购买实验室zhuan用纯水机，既方便又可靠，质量也放心。wei一的缺点就是价格不菲。

（2） 成箱购买市售品牌纯净水，如500ml 一支的怡宝或娃哈哈，这些水的质量足以应付液相色谱的要求。

这里特别指出一个细节：在绝大多数书本上，凡谈到配制流动相都会谈到最后有一个过滤的步骤。

在运用多元液相色谱仪时的一种不良运用习气容易造成活动相刚开始没有长菌，在运用时却产生了细菌污染。

举一个例子：50％的甲醇水活动相，有两种运用方式。一种方式是在液相色谱仪上机前就配好混合在一同，另一种方式是在流路A放纯甲醇，流路B放纯水。后一种有明显的优点简单，而且不需求实验者另个计算配比混合，其次就是比例jing确，能得到保存时间反复性*的实验效果。

但是，后一种方式有一个致命的缺陷是纯水在活动相瓶中几天时间就会长细菌（很多状况下不只仅用纯水作活动相，而是用缓冲盐溶液，自身就是优质肥料，细菌长得更疾速），一旦有细菌柱子就坏得很快。

所以这种方式*好是每次实验都用新制备的纯水，并且在每次实验后把水相换掉，换成甲醇冲洗洁净。

但是由于液相色谱仪柱子的梗塞是不可逆的，所以，还是比较推荐di一种方式，宁可牺牲较小的保留时间重复性，也不要用纯水溶液作为流动相的一组。

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