大（小）鼠Morris水迷宫实验实验方法

Morris水迷宫实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳，学习寻找隐藏在水中的平台的一种实验，主要用于测试实验动物对空间位置觉和方向觉(空间定位)的学习记忆能力。它广泛应用于学习记忆、阿尔茨海默病、海马和外海马、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学、行为生物学及时辰生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学(CAI)。

一、实验目的

检测动物的空间记忆和探索能力。

二、实验原理

大(小)鼠虽然天生会游泳，但是它们性喜干燥，厌恶潮湿，同时游泳对于其而言是十分消耗体力的活动，因此它们会本能地寻找水中的休息场所。寻找休息场所的行为涉及一个复杂的记忆过程，包括收集与空间定位有关的视觉信息，再对这些信息进行处理、整理、记忆、加固，然后再取出，目的是能成功地“航行”并且找到隐藏在水中的站台，*终从水中逃脱。

三、实验材料与方法

(一)实验材料

1.实验设备  Morris水迷宫。

2.实验动物及分组

(1)大鼠或小鼠(本实验以大鼠为例)。

(2)根据实验目的将大鼠分组，并将每只大鼠编号。

(3)分笼饲养，自由饮食，动物房温度21～25℃，相对湿度40％～60％，自然光照昼夜节律变化。

(二)实验具体方法

将各组大鼠在正式训练前**分别放入水中自由游泳2min，使其熟悉水迷宫环境。然后对各组大鼠正式进行Morris水迷宫测试。实验采用航行定位实验和空间探索实验分别测试大鼠的学习能力和记忆能力。

1.定位航行实验共5d  将大鼠从标记的4个入水点依次朝向池壁轻轻放入水中，采集大鼠在2min内寻找到并爬上平台所用的时间(平台在第3象限，平台低于水位2cm左右)，即逃避潜伏期(在站台上稳定10s算找到站台，否则继续记录)。如果大鼠2min内未找到平台，需将其牵引到平台，并停留60s，这时潜伏期记为2min。

2.空间探索实验1d  撤除平台，将大鼠放入水池中，记录大鼠在2min内在平台所放置的目标象限停留时间和穿越平台所在区域的次数。

(三)实验操作中的注意事项

(1)在开始实验前，实验者应与受试动物建立良好的感情，让动物熟悉实验者的身体信息，如气味、相貌等。捕捉动物的动作要温柔，忌讳手抓鼠尾，以免过分刺激动物。鼠的嗅觉很敏感的，在实验过程中应当避免使用较强气味的化妆品或香水。另外。如果大鼠能够看到实验者，在水迷宫实验过程中，实验者要躲藏或者保持固定位置，避免造成大鼠能够看到人体移动。

(2)水池不能太小，站台也不能太大，水池太小或站台太大都会增加大鼠随机上台的概率，出现假阳性结果。目前大鼠水迷宫的直径大多为1.2m或1.6m，本实验所采用的直径是1.6m。

(3)水温对逃避潜伏期影响很大：如果温度过高，大鼠游几次后渐渐适应迷宫环境，就把迷宫当成“浴盆”，在泳池中漂浮不动；如果温度过低，大鼠体温下降很快，体力也会耗散太多，不能坚持很久，就会出现游几次潜伏期突然增大的现象。所以要保证水温在23～25℃。

(4)要保证水迷宫水面上没有光影，主要是避免光线在水面的反射，以免留在水面的光照影子被软件的采集系统混淆为大鼠的影子，影响结果自动分析大鼠中心点。将屋子里的灯都关掉，窗帘都拉上，切断光源。

(5)尽量保证实验室内所有大鼠能够看到的外参在实验过程中都要位置固定。

(6)大鼠训练完成后要用干布擦拭。并用烤炉烤干。