漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。酶液的提取步骤:
1、细胞:按照细胞数量(10*个) :提取液体积(ml) 为500-1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率30% 或300W,超声3s,间隔7s,总时间3min),12000g 4C离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(ml) 为1:5-10 的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆; 1000g 4C离心10min,取上清,置冰上待测。
3、 培养液:直接待检。
漆酶活性检测试剂盒测定漆酶活性是利用漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。
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