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AF46型美国OPTEK紫外线分析仪在生物学研究应用表现在哪些方面

来源:东莞索菲特自动化设备有限公司   2021年02月25日 14:32  

AF46是一款双波长,高精度紫外线吸收分析仪,专为在线操作而设计,可提供浓度测量结果,并具有出色的可重复性,线性和分辨率。波长和光程长度可以单独配置以满足特定要求,以实现精度。
AF46是一款双波长紫外线分析仪,非常适合在下游生物技术应用(例如色谱或过滤)中监测蛋白质浓度(例如,单克隆抗体)。使用两个不同的波长,传感器能够检测到非常低的蛋白质浓度以进行准确的合并,同时能够使用第二个波长以非常高的光密度(OD)监控整个洗脱峰。
除了蛋白质测量外,传感器通常还用于监测蛋白质溶液的核酸污染。由于模块化,可以组合使用不同的光程长度(OPL)和波长来测量在UV范围内吸收的任何产品。

紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。AF46型美国OPTEK紫外线分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测,PCR产物检测,DNA指纹图谱分析,纸层分析或薄层分析等。图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形。

AF46型美国OPTEK紫外线分析仪在生物学研究应用
物质经过紫外线照射后发出荧光的现象可分为两种情况,一种是自发荧光,如叶绿素、血红素等经紫外线照射后,能发出红色的荧光,称为自发荧光;二种是诱发荧光,即物体经荧光染料染色后再通过紫外线照射发出荧光,称为诱发荧光。
荧光技术在生物化学及分子生物学研究中应用主要包括以下几个方面:
1、AF46型美国OPTEK紫外线分析仪物质的定性:不同的荧光物质有不同的激发光谱和发射光谱,因此可用荧光进行物质的鉴别。与吸收光谱法相比,荧光法具有更高的选择性。
2、AF46型美国OPTEK紫外线分析仪定量测定:利用在较低浓度下荧光强度与样品浓度成正比这一关系可以定量分析样品中荧光组分的含量,常用于测定氨基酸、蛋白质、核酸的含量。荧光定量测定的一个优点是灵敏度高,例如维生素B2的测定*可达1毫微克/毫升,这一优点使测定时所需要样品量大大减少。 这种定量测定方法还可应用于酶催化的反应,只要反应前后有荧光强度的变化,就可用来测定酶的含量及酶反应的速率等。
3、AF46型美国OPTEK紫外线分析仪研究生物大分子的物理化学特性及其分子的结构和构象:荧光的激发光谱、发射光谱、量子产率和荧光寿命等参数不仅和分子内荧光发色基团的本身结构有关,而且还强烈地依赖于发色团周围的环境,即对周围环境十分敏感。利用此特点可通过测定上述有关荧光参数的变化来研究荧光发色团所在部位的微环境的特征及其变化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的荧光发色团(如色氨酸、酪氨酸、鸟苷酸等,此类荧光称为内源荧光)以外,可将一些特殊的荧光染料分子共价地结合或吸附在生物大分子的某一部位,通过测定该染料分子的荧光特性变化来研究生物大分子,这种染料分子被称为“荧光探针”,它们发出的荧光一般称为外源荧光。荧光探针的应用,大大地开拓了荧光技术在分子生物学中的应用范围。
4、AF46型美国OPTEK紫外线分析仪利用荧光寿命、量子产率等参数可以研究生物大分子中的能量转移现象:通过该现象的研究,可以获得生物大分子内部的许多信息。

以往人们常用荧光偏振做指标来研究生物大分子动力学。人们趋于用荧光偏振随时间的衰减来研究这些问题。在这种方法中,激发光不是一连续的面偏振光,而是一偏振的光脉冲,因此测得的F∥和F是在两个不同方向上偏振的荧光随时间的衰减,它既和荧光寿命τ有关,又与分子在溶液中的运动有关,因此常表示为F∥(t)和F⊥(t)。由它们可得一相当重要的物理量——各向异性参数A(t)。由A(t)可推测生物大分子的形状、分子转动弛豫时间(即从一个定向的状态到一个无定向状态所要的时间),进而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的转动角度和时间之间的函数关系。由这些结果可以研究分子之间的相互作用、分子间结合的紧密程度、蛋白质、核酸分子的解聚程度等等。
另外,AF46型美国OPTEK紫外线分析仪在免疫学中亦有广泛的应用。重要的就是荧光抗体法。将某些荧光染料与血清抗体相结合,这种标记的抗体仍可专一地与相应抗原发生结合,形成的复合体具有荧光特性,从而可以确定抗原或抗体的存在及其含量。

利用荧光技术设计的AF46型美国OPTEK紫外线分析仪主要是物质的定性方面的应用,包括:
⑴在科学实验工作中检测,许多主要物质如蛋白质、核苷酸等。
⑵在药物生产和研究中,可用来检查激素生物碱,维生素等各种能;产生荧光药品质量,特别适宜作薄层分析和纸层分析斑点和检测。
⑶在染料涂料橡胶、石油等化学行业中,测定各种荧光材料,荧光指示剂及添加剂,鉴别不同种类的原油和橡胶制品。
⑷纺织化学纤维中可测定不同种类的原材料。如羊毛,真丝人造纤维,棉花,合成纤维,并可检查成品质量。
⑸在粮油,蔬菜,食品部门,可用于检查毒素(如黄曲/霉素等),食品添加剂,变质的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的质量。
⑹在地质、考古等部门,可起到发现各种矿物质,判别文物化石的真伪。
⑺在部门可检查指纹、测定密写字迹等。

AF46型美国OPTEK紫外线分析仪用于
紫外线范围:
0-0.05至2 CU(浓度单位),取决于所使用的滤波器/ OPL
紫外线吸收控制和紫外线吸收控制
色谱中的应用:柱前/柱后监控(OD),用于优化合并
渗透物或截留物中的浓度
在TFF中/超滤
水/冷凝水中有机负荷的变化
芳烃(己内酰胺,苯胺,苯酚等)的浓度
作为TOC,COD,BOD趋势分析
水的消毒控制处理

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