Calypso生物大分子相互作用分析仪工作原理

　　Calypso生物大分子相互作用分析仪是一个以组分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)为基础的生物大分子间相互作用分析系统，可以快速、自动、无损、定量的表征大分子间的相互作用，具有重复性高、灵敏度高及无需样品修饰等诸多优点。该系统可以分析分子间的特异性及非特异性相互作用，聚集或解离的动力学等。对于分子间的特异性相互作用，Calypso可以测定其自聚作用及不同样品分子间的异聚作用，得到平衡解离常数Kd及反应的化学计量数。对于非特异性相互作用，可以测定其维力系数，并判断分子间的作用力及强度。此外，Calypso还可以测定反应的动力学，样品的重均分子量及均方根半径等重要分子信息。Calypso分析系统无需对样品进行修饰(荧光标记、固定化等)，且在溶液环境中测量，因此可以大程度的保证样品的天然状态，从而得到其他技术难以得到的结果，真实的表征生物大分子间的相互作用，样品方便回收。

 

　　Calypso生物大分子相互作用分析仪工作原理：组分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是新的分析技术之一，利用分子量的变化测定分子间的相互作用。溶液中大分子的散射光强依赖于物质的浓度C和重均分子量Mw，分子间发生复合，Mw则增加。例如，若所有的蛋白质分子以二聚体形式出现，则散射光强也会增倍。对于可逆的聚集，蛋白与单体蛋白复合的比例会达到一个平衡值，这个值依赖于每种蛋白初始的浓度和缓冲液的条件。不同的组成和浓度会导致Mw不同。通过分析一系列不同组成和浓度的光散射结果，可以确定所发生的聚集形式、各自的结合亲和力Ka、结合和解离平衡常数。手动配制比例及测量是一项繁琐、费时间且容易产生操作误差的工作，Calypso系统通过自动化的过程克服了CG-MALS手动操作的困难，将样品配制、输送及数据的采集和分析集合于一体，完美的保证了实验的重复性，并解决了人工配制样品时引入操作误差的问题。