1、确定目标对象:也就是你所有转的目的物是什么东西?
细胞系和细胞类型
细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等
细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato,Trypanosome,E coli等
2、其次确定目的
目的包括:转染 转化 电整合 电插入 活体/卵的应用 核移植和克隆 细胞融合
然后根据这些来确定该选择什么类型的仪器。
1、 某位老师使用化学法转化大肠杆菌E.coli。他希望构建cDNA文库,但是不能得到好的转化效率。他以后还想做哺乳动物细胞。如何来选择仪器:
选择方案:ECM 399将是较好的选择,这仪器用来转化E.coli效果十分理想,同时操作简单。如果有足够的预算,可以选择ECM 630, 这样更符合他现在和将来的需求。
2、某位老师想要进行一些鸡胚的研究工作,他们希望转染鸡的眼睛,以便研究视觉膜的发育过程。他对卵的基因传递有一些了解。
选择方案:完成这个转染过程需要 ECM 830和活体电极Genetrodes。由于目标区域很小,他需要小的长的genetrode。方波适合动物体的活体转基因,同时针形的电极是卵的转基因的选。
3、遗传研究中心希望开展某种疾病的基因治疗,首先从小动物例如小鼠,以后要在狗、猪等动物体开展。客户希望用基因枪的方法。但是觉得条件不易控制。
选择方案:基因枪不是理想的活体转基因的方法。基因枪容易伤害哺乳动物的组织,同时条件可控性差,DNA的转移效果不理想。推荐使用ECM 830 和2 Needle Array 用于小动物研究,对于大的动物研究的话还需配 caliper electrode。
4、Dr. Mendle使用agrobacteria来转化烟草的原生质体。他在寻找快速在完整的植株上完成转基因的方法。此时如何选择?
选择方案:ECM 630和特殊电极。电极的选择需要根据植物转基因的部位。一般有三种电极可以选择Tweezertrode、 Caliper Electrode、 Needle Arrays.根据他所转的植物体大小,硬度等进行
5、Dr. Hofmann正使用脂质体方法转染原代神经细胞,但是结果差强人意,仅得到1%的转染效率。但是他不希望使用电转,因为怕杀死细胞。这些希望不能被胰蛋白酶消化(会引起其他变化)所以他不能使用样品杯。给怎么办。
选择方案:推荐使用ECM 830 和petri dish 电极或者epizap电极。这样可以用温和的方法完成原位转基因。
6、 Dr. Bloom希望你给他推荐一款融合仪。他过去使用化学的方法来进行的。怎么来推荐。
选择方案:如果费用允许, ECM 2001是的选择。它提供交流波能排列细胞,可以完成所有的细胞融合试验。如果费用不足的话,ECM830也可以完成核移植的工作,在融合时需要将两个细胞进行排列,或者细胞的浓度足够大。
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