动物疫病检测方法：

【为何要做实验室检测】

如今猪场现场疫病的状况越来越复杂化，单感染的，共感染的，继发感染的，情况各不相同；同时多种疾病有相似的临床表现，比如，同是母猪发生流产，有可能是PRRSV，PRV，CSFV，但是其实JEV，PCV2等病原都有可能引起繁殖障碍，甚至有些时候引起流产的并不是病原感染而是应激、中毒等非传染性因素；此外，随着一些疾病疫苗免疫的普遍，毒株致病性的减弱，在感染后出现亚临床感染几率增多，当年临床老司机们想要仅凭着一把手术刀(有时其实是杀猪刀），一双眼睛就叱咤风云猪群间已经越来越难了，只能感慨“看不懂”，这病越来越不按教科书那样得了。还得依靠天眼--—实验室各种仪器设备和实验方法来甄别，为各个病原了断清白，争取做到不放过一个坏人，也不错怪一个好人。

 诊断的结果往往可以用来参考是否需要调整饲料，是采取闭群、淘汰、还是可以引种了，同时确定是疫苗全群免疫还是只做后备驯化，其效果如何；何时需要做抗生素保健。

具体怎么做实验室诊断和监测呢？今天先聊一聊血清学的检测技术。

　　【血清学检测技术】

　　血清学检测技术大部分的都是用的抗原抗体间的特异性结合特性来检测血清中的某种病原的抗体。常见的抗体检测机技术包括：

　　酶联免疫吸附实验（ELISA）

　　胶体金试纸条

　　间接免疫荧光（IFA）

　　血凝血抑实验（HA & HI )

　　病毒中和实验（VN）

　　免疫电泳（敏感度太低，操作麻烦）

　　血清学检测界一姐”ELSIA“（伊莱挲，与日本艺人”野田绘理纱“同名----不搜不识啊，上次Boss Yang相声辅修专业学生寒同学被实验暴虐后扬言要给未来的女儿取名ELISA，看样子还挺洋气），无论检测疫病种类还是单品使用率都是，今天先着重讲讲她。基本原理是将抗原（病毒细菌等病原成分）或者抗体结合在固相载体（聚苯乙烯）上利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。通俗点说就是利用抗原抗体特异性结合将酶挂到板子上，然后催化底物反应显色，根据显色的深浅，判断酶的多少，间接反应有没有或者有多少抗体（或抗原）加进去并吸附上了。大的特点是既可以检有没有（定性），也可以检有多少（定量）。

　　根据抗原抗体的排列组合方式可以分成以下几种：

　　直接法：直接酶标一抗，简单粗暴，相对操作简便，加样次数少，只有一次抗原抗体反应，貌似包谁检谁都不太方便，所有一抗做标记，不是都能标，而且贵。

　　间接法：原理简单，易懂，猪病检测上，一般先包被病原的某个抗原或者全病毒，然后加入猪的待检血清（一抗）然后用其他动物（一般是羊）抗猪酶标记抗体加上去催化底物。（PRRSV抗体检测就用该方法）

　　夹心法：多用于抗原检测，包被抗体，然后加入待检的样品（含病毒或其他微生物或相应的成分），再加另外一个抗体（可是单抗也可是多抗）后再加异源动物的酶标二抗来催化底物。优势：高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。缺点：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

　　竞争法：竞争法一般用于检测无法同时与两种抗体结合的小分子抗原。优势：可适用比较不纯的样本，而且数据再现性很高。缺点：整体的敏感性和专一性都较差。

　　常见猪病的检测靶标：

　　上面列的其实也就是猪场常规检测的老三项+口蹄疫的附加项。具体要求每个方面的检测数据如何解读，等后面聊案例的时候再做详细解答。

　　后附上硬通货：

CSY-E96D动物疾病快速诊断仪采用固相酶联免疫吸附ELISA的原理,即酶联免疫法；可定量快速畜牧类疾病诊断如禽流感、猪瘟、猪蓝耳、伪狂犬等疾病，广泛应用于养殖场、屠宰场、肉产品深加工企业、检验检疫单位使用。

技术参数：

☆波长范围:300nm-1000nm

☆波长准确度:±2nm

☆吸光度范围: 0.000~4.000ABS

☆分辨率 :0.001Abs

☆稳定性 : ±0.001A/hr

☆透射比重复性: ≤0.5%T

☆光源 : 进口LED

☆样品池 : 微孔板