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多肽_什么是多肽_多肽分类

来源:合肥国肽生物科技有限公司   2020年07月28日 15:22  

多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称,常常被应用于功能分析、抗体研究、尤其是药物研发等领域。多肽合成技术的出现,让这些多肽的应用领域变得更宽。

多肽的固相合成

多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,后将肽链从树脂上裂解下来,分离纯化,获得目标多肽。

1、Boc多肽合成法

Boc方法是经典的多肽固相合成法,以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基,苄醇类作为侧链保护基,Boc的脱除通常采用三(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上,TFA切除Boc保护基,N端用弱碱中和。

肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行,终采用强酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中,为了便于下一步的多肽合成,反复用酸进行脱保护,一些副反应被带入实验中,例如多肽容易从树脂上切除下来,氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。

2、Fmoc多肽合成法

Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。

Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的,不受TFA等试剂的影响,应用温和的碱处理可脱保护,所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。

肽段的后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成,避免了采用强酸。同时,与Boc法相比,Fmoc法反应条件温和,副反应少,产率高,并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收,易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。

多肽合成服务种类

多肽合成服务通常有线性肽合成服务、多种难肽合成服务、修饰肽合成服务、以及部分多肽合成公司还会提供多肽定制服务,定制出有针对性的合成肽。

目前有多肽合成公司提供的线性肽合成可达150个氨基酸以内,在修饰肽合成上,能提供常见修饰,磷酸肽,RGD环肽,荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等),生物素标记肽/复合抗原(MAP)/含D型氨基酸,及各种氨基酸衍生物均可合成。

多肽产物纯度选择

常见的质谱级多肽纯度,一般要求>95%

用于抗体筛选纯度,一般>85%即可

NMR和结晶试验中,纯度一般>98%

粗品肽,一般>50%即可用于多肽筛选

 

多肽分类

多肽修饰分类

C端酰胺化(Amidation,C-termainal)

醛基化(Aldehydes)

醇基化(Alcohols)

pNA (p-Nitroanilide)

AMC

C端标记技术

AFC

巯基乙胺化(Cysteamide)

酯基化(Ester)

N-烷基化(N-Alkyl Amides)

N端标记技术

乙酰化Acetylated (Acetylated)

Palmytolyl

HYNIC

生物素标记(Biotinylated)

Br乙酰化(Bromoacetylated)

螯合反应(DOTA,DTPA conjugated)

甲醛化(Formylated)

十四烷基,十八烷基化(Myristoylated)

琥珀酰化、棕榈酸化、苹果酸化、脂肪酸化等(Succinylated)

荧光标记修饰

C端修饰: AFC, AMC, Dap(Dnp), Lys(Dye), pNA, Rh110   

N端修饰: Bodipy-FL, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-lodoacetamido fluorescein Rhodamine 110 and Rhodamine B Luciferin, EDANS  FAM, FITC, MCA, Rox, Sulforhodamine 101, 5-TAMRA

环化反应

首尾成环,中间成环,特殊成环(N -> C or Head to Tail)

2对二硫键,3对二硫键(Disulfide (S-S bond formation) .Trisulfide formation)

天然产物活性肽成环(Cyclic-natural peptides )

甲基化修饰

侧链甲基化Lys(For),Lys(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)

N端甲基化(N-Me-Arg,N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N- Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)

几种特殊修饰

各种偶联(BSA, KLH conjugated peptides for antibody production  

磷酸化(Phosphoserine, Phosphothreonine, Phosphotyrosine)

磺化(Sulfated Tyrosine or Serine)

MAPS (Multiple Antigenic Peptide)

糖肽(Glycopeptides)

PEG修饰(PEGylation)

 

国肽生物按照客户定制要求供应高品质普通多肽。
我们拥有成熟的多肽合成纯化方法,利用SPPS方法和液相合成方法为客户提供高品质多肽。我们的服务特点是:
1. 纯度:我们提供粗品肽和纯度纯度为70%,75%,80%,85%,90%,95%,98%,99%的纯品多肽。
2.脱盐和转盐:根据客户要求,我们可以对多肽进行脱TFA盐处理,也可以转为醋酸盐。
3.交货期限:30个氨基酸之内,一般2-3周,1-2周。
4.质量控制:每条多肽都免费提供合格的HPLC,MS和COA文件。
5.售后服务:1-2周内可以提出异议,我们免费复测,不合格免费退货,1-3个月内使用不合格可以免费提供复测,样品免费保存3个月。

国肽生物根据客户要求,供应各种修饰型多肽。
1.磷酸化的Ser、Tyr和Thr修饰的多肽:我们提供单磷酸化和多磷酸化多肽服务,目前我们已经能够提供四个磷酸化位点修饰的多肽。
2.5(6)-FAM,FITC,CY5,RhodamineB,PNA,EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽:荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术,我们的这项技术已经相当成熟。
3.生物素Biotin,Lys(Biotin)修饰的多肽:生物素是维生素B2的组成部分,Biotin,Lys(Biotin)修饰的多肽也是客户经常定制的多肽。我们提供生物素修饰的多肽已经有将近100%的成功率。
4.含有一对或多对二硫键修饰的多肽:二硫键在蛋白质的结构稳定中起到重要作用,目前我们已经能够为客户提供四对二硫键修饰的多肽。
5.含有同位素C13,N15修饰的多肽:同位素标记的多肽主要应用于医学和生物学领域,通常价格较高,为了满足客户需要,我们接受微克级的同位素多肽定制。
6.含有特殊氨基酸修饰的多肽:例如,D型氨基酸,氨基酸衍生物,脂肪族羧酸等等,都在我们接受的定制范围内。

国肽生物提供150个氨基酸以内的长肽合成服务。
多肽合成过程中,肽链过长时,经常会出现缺残基,氨基酸缩合困难等情况,基于这些现象,我们开发了三种有效提高反应成功率的方案:
1. 微波合成法:对于合成过程中出现的一些难以缩合的氨基酸,我们采用微波法进行合成,该方法*,并且大大缩短了反应时间。
2. 片段合成法:当某些多肽用常规合成方法合成困难,我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去,这种方法也能够解决许多合成中存在的问题。
3.酰肼合成法:酰肼法合成多肽的方法是将固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽的连接,该方法根据肽链中Cys的位置,将整条肽链分成多条序列分别合成,终经过液相缩合反应得到目标肽,显著地提高了终产物纯度,广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。
国肽生物拥有成熟的长肽合成工艺,能够根据客户定制的多肽序列,快速有效地设计合成方案并迅速开始合成,更快更好的为客户提供所需的服务是我们不变的坚持。

国肽生物主要提供:多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。详情请咨询国肽生物

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