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智能拉曼光谱仪的校准包括三个要素：初始波长（X轴）、激光波长以及强度（Y轴）。仪器厂家应提供一种由用户可以执行的，对仪器相关参数校准的方法，除另有规定外，使用者应根据仪器所提供的校准方法制定具体的SOP，并严格按照SOP对上述参数进行验证。
特别需要注意，激光波长变化可影响仪器的波长精度和光度（强度）精度。即使是稳定的激光器在使用过程中，其输出波长也会有轻微变化。所以，激光波长必须被校正以确保拉曼位移的准确性。可以使用仪器厂家提供的拉曼位移标准参考物质进行定期校正。某些仪器可以用一种拉曼内标物与初级光路分离，外在校准装置通过散射辐射准确地重现这一光路。推荐大家使用外部参考标准对拉曼光谱仪进行校正。
智能拉曼光谱仪的相关方法验证：
对拉曼方法进行验证是必须的，至少应考察准确度、精密度等主要指标，然而这些指标受诸多可变因素的影响，其中荧光可能是影响方法适用性的主要变量。样品中荧光杂质的存在*随样品而异。所以方法必须能适应不同样品体系，必须足以将杂质的影响降到小。
检测器的线性必须适应可能的信号水平范围。荧光可能使信号基线比验证时高，这时必须设法将荧光减弱或者使验证的方法适应较高的荧光水平。这一要求对方法的精密度，检测限（LOD）和定量限（LOQ）同样适用，因为基线噪声的增加会对这些数值产生影响。
由于荧光使基线漂移可能同样会影响定量，所以使用时同样需要在不同的光漂白作用水平进行可接受的定量验证。
确定激光是否对样品造成影响。在不同激光功率和暴露时间的条件下，对样品目视检查和仔细审视测得的拉曼光谱测量可以确定样品是否改变（而不是光漂白作用）。观察到依据是谱带的位置、峰强和谱带宽度是否改变或者背景强度是否有明显的变化。
影响方法精密度的因素包括样品的位置。样品的形态对于固体或液体都是非常重要的因素，在校正模型中必须严密控制或说明。样品的制备方法或样品试架的形状可能影响测量灵敏度，而且该灵敏度会随着仪器的激发光和采集光学设置的不同而不同。
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