液相色谱柱的使用与维护之色谱柱使用注意事项

一般使用注意事项

色谱柱的剧烈震动可能导致柱床断层，因此使用过程中需要避免强烈撞击、摔打，需轻拿轻放。

不同类型色谱柱耐压能力不同，请在规定的压力范围内使用。

流动相pH不要超过色谱柱pH使用范围，特别是碱性较高的流动相条件对色谱柱伤害较大，同时流动相条件不要频繁发生大幅度变化，否则会导致色谱柱更容易劣化。

大曹三耀常见色谱柱pH使用范围：

C18 MG 系列柱        pH2-10

C18 AQ 系列柱         pH2-9

C18 ACR 系列柱       pH1-10

C18 BB 系列柱         pH1-11

SCX柱                     pH2-7

NH2柱                     pH2-8

PC HILIC柱              pH3-7.5

为防止由异物进入导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞，建议使用线上过滤器或预柱。

复杂基质样品有可能导致色谱柱的突然性堵塞或寿命减短，因此样品需经过充分前处理，可能情况下高速离心并过滤。

色谱柱一般使用柱温为20-45℃，更高柱温条件方法可以应用，但一般情况下柱温越高，色谱柱越易劣化。

更换流动相时请注意流动相之间的互溶情况，不要发生盐析。

通常情况下，正相条件需要充分过渡，要避免仪器中残留超纯水的干扰。

实验完毕后，停止流动相供液，在泵压力指示降为0后再进行色谱柱的安装和拆卸，以免压力急剧变化导致色谱柱损坏。

非C18系列色谱柱使用注意事项

1. 离子交换型色谱柱

1.1 一般使用注意事项同上

1.2 离子交换分析流动相一般为含盐水溶液或和有机溶剂的混合体系，新SCX柱、NH2柱均使用纯乙腈封存，直接使用流动相置换会导致盐析，因此必须经过水-有机相体系过渡后，才可使用流动相。

1.3 离子交换型色谱柱不可用超纯水冲洗或过渡，但可使用含有离子的水系流动相。

1.4 新色谱柱初次使用平衡时间长，SCX、NH2柱使用含缓冲盐流动相时，推荐使用流动相小流速平衡过夜。

2. HILIC型色谱柱

2.1 一般使用注意事项同上

2.2 HILIC型色谱柱通常在70%以上乙腈条件下使用，乙腈比例过低会导致色谱柱寿命减短。

2.3 NH2色谱柱在HILIC模式分析下分析糖类物质，流动相不得添加缓冲盐。

2.4 新色谱柱初次使用平衡时间较长，一般需要2-4h流动相平衡。