凯氏定氮仪KDN-04C操作方法

1. 仪器安装：

将配件中的硅胶管根据实际需求剪成不同的长度，按照上面左侧示意图连接好（注意接紧，止漏水）。蒸馏水和碱液的硅胶管另一端必须浸泡在所对应的液面以下。蒸馏水出口和冷却水出口的硅胶管另一端放入排水池（桶）。冷却水连接自来水。在仪器正面左侧托盘上安放空的消化管，右侧放锥形瓶，插入带橡皮塞的玻璃嘴。

2. 仪器检测：

⑴．打开冷却水（水开关），注意流量，控制在3-4L/分钟。接上电源线，打开电源总开关。仪器开始自动加水，从侧面烧杯水位观测口可以看见烧杯内的水位上升，一段时间后会自动停止加水（由系统内水位探针自动控制，水位不足会持续加水）。

⑵．打开加碱按钮，加碱量大概在30mL左右时，关闭加碱按钮.接着打开蒸馏按钮，仪器开始蒸馏。仪器工作10分钟左右（锥形瓶内液体在100-150mL左右），关闭蒸馏按钮（灯熄灭），仪器停止蒸馏，整机检测完成。

3. 实验蒸馏：

在消化管托盘上换上已消化完成并冷却稀释后(一般加20ml蒸馏水稀释)的样品，右侧换成准备好的锥形瓶（锥形瓶内加入50ml硼酸和4-5滴混合指示剂，具体硼酸量由各自实验情况确定），调整氨气回流玻璃嘴和瓶塞，使玻璃嘴浸泡在硼酸液面以下。

然后先打开加碱按钮，加到自己所需要的碱的用量后（确保液体颜色变黑为止），关闭加碱按钮。然后再打开蒸馏按钮。

蒸馏即将完成时（一般蒸馏时间8-12分钟左右，锥形瓶内液体在150-200ml左右），提起橡皮塞，移开锥形瓶，使氨气回流玻璃嘴离开液面，用蒸馏水冲洗玻璃嘴外壁，继续蒸馏10秒钟后，关闭蒸馏按钮，取下锥形瓶待滴定用。

注意：更换样品蒸馏时不需要关闭电源总开关。

4．滴定/计算（以下数据仅供参考，以本行业标准为主）

用0.05mol/LHCL滴定接收瓶内的溶液，滴定至（暗）灰色时为止，记下消耗HCL的毫升数，按下列式子计算蛋白含量：

蛋白质%＝

式中： V₁—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；

      V₂—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积，ml；

      N—硫酸或盐酸标准溶液当量浓度；

      0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数；

      m—样品的（体积），g（ml）；

         F—蛋白质系数，按16%计算乘以6.25即为蛋白质。

        (空白测定：用0.1克糖代替样品或不加样品作空白测定)

5. 清洗/关机

先换上空的消化管和锥形瓶，把连碱的硅胶管换成新的一个硅胶管，另一端放入蒸馏水容器内，然后按蒸馏按钮，用蒸馏水清洗碱泵，一般30秒钟左右后取下碱进硅胶管，排空碱路里面的液体。

然后关闭冷却水（自来水），打开蒸馏水排水开关，排完蒸馏水。后关闭总电源开关，拔掉电源线。（后一天实验做完后必须进行关机清洗操作）。